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dc.contributor.advisorSaavedra, Claudiaes
dc.contributor.authorMorales Sierra, Eduardo Hugoes
dc.contributor.editorFacultad de Ciencias Biológicases
dc.date.accessioned2015-04-22T18:19:19Zes
dc.date.accessioned2016-07-26T19:18:32Z
dc.date.available2015-04-22T18:19:19Zes
dc.date.available2016-07-26T19:18:32Z
dc.date.issued2013es
dc.identifier.urihttp://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/1223
dc.descriptionTesis (Doctor en Biociencias Moleculares)es
dc.description.abstractRESUMEN: Salmonella enterica serovar Typhimurium es una bacteria Gram-negativo, anaerobio facultativo y patógeno intracelular que genera fiebre entérica en el modelo murino. Una vez ingerida por vía oral atraviesa el intestino y es internalizada por las células fagocíticas. En este lugar, es contenida en un fagosoma especializado denominado “vacuola contenedora de Salmonella”, donde se encuentra con una serie de compuestos antimicrobianos incluyendo las especies reactivas de oxígeno (ROS). Para sobrevivir, la bacteria ha generado diversos mecanismos de defensa que incluyen modulación de la producción de ROS, su degradación directa y cambios en la permeabilidad de su membrana externa. En este contexto, la expresión de diversos genes que codifican porinas se ve alterada en respuesta a ROS y adicionalmente presentan diversos sitios de unión para el regulador global ArcA. Esto nos llevó a la hipótesis de que “El sistema de dos componentes ArcAB detecta y responde a estrés oxidativo en Salmonella enterica serovar Typhimurium y produce cambios en la expresión génica para su supervivencia”. Mediante la medición de los niveles de transcrito de los genes ompD, ompW, ompS1 y ompS2 y ensayos de cambio en la movilidad electroforética se demostró que el sistema de dos componentes ArcAB modulaba su expresión de manera directa en respuesta a ROS. Una vez demostrado que el sistema participaba regulando la expresión génica en estas condiciones, se evaluaron cambios transcripcionales globales mediante hibridación en microarreglos. El análisis reveló que ArcA regula 58 genes en respuesta a H2O2 mientras ArcB 68 y que la regulación de cada miembro del sistema es independiente entre sí. ArcA regula la expresión de genes implicados en metabolismo central, síntesis de sideróforos, glutatión y nucleótidos. Por su parte, el rol de ArcB se asocia principalmente con la...es
dc.description.abstractABSTRACT: Salmonella enterica serovar Typhimurium is a Gram-negative bacterium, facultative anaerobe and intracellular pathogen that generates enteric fever in the murine model. Once orally ingested it is internalized by phagocytic cells, where it is contained in a specialized compartment denominated the “Salmonella containing vacuole”, where it encounters a series of antimicrobial compouns including reactive oxygen species (ROS). In order to survive, Salmonella has generated several defense mechanisms including modulating ROS generation, its direct degradation and changes in outer membrane permeability. In this context, the expression of of several genes coding porins is altered in response to ROS and present several binding sites for the global regulator ArcA. This lead to the hypothesis that “The ArcAB two-componenet system detects and responds to oxidative stress in Salmonella enterica serovar Typhimurium and generates changes in gene expression for its survival”. By measuring the transcript levels of ompD, ompW, ompS1 y ompS2 and through electrophoretic mobility shift assays we demonstrated that ArcAB modulated their expression in response to ROS. Once demonstrated that the system played a role in regulating gene expression under this condition, global transcriptional changes were evaluated by microarrays. The analysis revealed that ArcA regulates the expression of 58 genes in response to H2O2 while ArcB 68 and that the regulation of each member of the system was independent from its cognate partner. ArcA regulates the expression of genes implicated in central metabolism, siderophore, glutathione and nucleotide biosynthesis. On the other hand, ArcB is involved in regulating the expression of genes implicated in amino acid biosynthesis. Biochemical...en
dc.language.isoeses
dc.publisherUniversidad Andrés Belloes
dc.relation.ispartofseriesClasificación: 572.8 M828 2013es
dc.subjectSalmonella.es
dc.subjectEstrés Oxidativo.es
dc.titleCaracterización bioquímica y funcional del sistema de dos componentes ArcAB de Salmonella enterica serovar Typhimurium en respuesta a condiciones de estrés oxidativo.es
dc.typeTesises


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