Estudio de la funciĆ³n de la variante de histona macroH2A2 en el desarrollo de la retina del pez cebra
No hay miniatura disponible
Archivos
Fecha
2012
Autores
Profesor/a GuĆa
Facultad/escuela
Idioma
es
TĆtulo de la revista
ISSN de la revista
TĆtulo del volumen
Editor
Universidad AndrƩs Bello
Nombre de Curso
Licencia CC
Licencia CC
Resumen
a variante de histona macroH2A regula la expresiĆ³n gĆ©nica principalmente por represiĆ³n de la transcripciĆ³n, asociĆ”ndose a eventos de heterocromatinizaciĆ³n, como la inactivaciĆ³n del cromosoma X. Estudios in vitro indican que macroH2A podrĆa regular el desarrollo embrionario, permitiendo la expresiĆ³n de genes Hox y de las familias gĆ©nicas Dix, Pax y Six que regulan el desarrollo temprano del sistema nervioso, ojo y retina. AdemĆ”s, sĆ³lo el transcrito de la isoforma macroH2A2 se expresa durante el desarrollo embrionario del pez cebra. En este contexto el objetivo principal de este trabajo fue la caracterizaciĆ³n de la funciĆ³n de macroH2A2 durante la formaciĆ³n de la retina del pez cebra.
La determinaciĆ³n del patrĆ³n de expresiĆ³n del transcrito macroH2A de pez cebra por hibridaciĆ³n in situ, muestra que sĆ³lo la isoforma macroH2A2 se expresa en el cerebro y retina durante el desarrollo embrionario, principalmente en la regiĆ³n anterior del embriĆ³n, en el primordio, vesĆcula y copa Ć³pticas, el neuroepitelio retinal y en las capas de cĆ©lulas ganglionares y plexiforme interna de la retina diferenciada. Esta expresiĆ³n concuerda con las etapas de proliferaciĆ³n, especificaciĆ³n y diferenciaciĆ³n de distintos territorios en el sistema nervioso central, especialmente con el desarrollo de la retina.
Con estos antecedentes se decidiĆ³ caracterizar el efecto de la falta de funciĆ³n (knockdown) de macroH2A2 durante el desarrollo de la retina usando la inyecciĆ³n de morfolinos especĆficos. El knockdown especĆfico de macroH2A2 afectĆ³ principalmente la regiĆ³n anterior del embriĆ³n, coincidente con los territorios de expresiĆ³n del transcrito de macroH2A2. Se obtuvieron dos fenotipos reproducibles y dependientes de la concentraciĆ³n de morfolino inyectado: embriones acĆ©falos (fenotipo severo) y con microcefalia, microftalmia y ausencia de las capas retinales (fenotipo leve). Este Ćŗltimo consecuencia de una retinogenesis defectuosa.
La caracterizaciĆ³n del fenotipo leve, durante el desarrollo de la retina muestra que la etapa proliferativa de los progenitores retinales, que darĆ”n origen a todos los tipos celulares de la retina, se llevĆ³ a cabo normalmente. Sin embargo, la etapa de determinaciĆ³n ocurriĆ³ en forma defectuosa. Se observaron defectos en la inhibiciĆ³n de la proliferaciĆ³n, necesaria para la salida del ciclo celular de los progenitores retinales y posterior diferenciaciĆ³n. En la retina de las larvas morfantes se mantuvieron elevados los niveles de ciclinaD1, PCNA y p-Histona H3, con un evidente alargamiento de la fase S del ciclo celular. Por otro lado, tambiĆ©n se detectaron niveles aumentados de [3- catenina en las retinas morfantes de macroH2A2, siendo posiblemente Ć©sta una de las causas de la proliferaciĆ³n aumentada observada en tejido de la retina. Estos antecedentes sugieren fuertemente que macroH2A2 contribuirĆa a la regulaciĆ³n de la inhibiciĆ³n de la vĆa de seƱalizaciĆ³n Wnt/[3-catenina en la retina en desarrollo y que ademĆ”s serĆa necesaria para la progresiĆ³n y salida del ciclo celular de los progenitores retinales.
Este trabajo de tesis es el primer estudio in vivo que describe la funciĆ³n de la variante de histona macroH2A2 en un proceso especĆfico del desarrollo embrionario, la retinogenesis. Estos datos contribuyen a aumentar nuestro conocimiento, aĆŗn escaso, sobre la participaciĆ³n de mecanismos epigenĆ©tico en el desarrollo embrionario.
Notas
Tesis (Doctor en Biociencias Moleculares)
Palabras clave
Pez Cebra, Investigaciones