Aislamiento y caracterizaciĆ³n del factor de transcripciĆ³n ICE1 de Eucalyptus globulus
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Fecha
2011
Profesor/a GuĆa
Facultad/escuela
Idioma
es
TĆtulo de la revista
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TĆtulo del volumen
Editor
Universidad AndrƩs Bello
Nombre de Curso
Licencia CC
Licencia CC
Resumen
ICE1 es un factor de transcripciĆ³n que es activado en respuesta a condiciones de frĆo en plantas. Es considerado como el componente clave dentro de la cascada de seƱalizaciĆ³n de frĆo, activando la respuesta mediada por los factores de transcripciĆ³n de uniĆ³n a e-repetidos (CBFs) y gatillando la expresiĆ³n de los genes localizados rĆo debajo de esta cascada.
En esta tesis aislamos un cDNA que codifica para la proteĆna ICE1 de Eucalyptus g/obu/us (Eg/CE1) a partir de una librerĆa de cDNA construida bajo condiciones de frĆo. La secuencia de cDNA posee un marco de lectura abierto de 1683 pb y codifica para una proteĆna de 560 aminoĆ”cidos, con un peso molecular estimado de 60,48 kDa y un pi calculado de 5,65. La comparaciĆ³n de la secuencia de cDNA con la obtenida a partir de DNA genĆ³mico demostrĆ³ que Eg/CE1 no posee intrones, confirmĆ”ndose la presencia de todos los dominios caracterĆsticos de las proteĆnas ICE1 descritas actualmente. Adicionalmente, encontramos un dominio de activaciĆ³n extra, que probablemente aumenta la actividad del factor de transcripciĆ³n EglCE1. Este dominio tambiĆ©n estĆ” presente en proteĆnas ICE1 de otras especies de Eucalyptus.
Ensayos de expresiĆ³n transientes demostraron que EglCE1 es un factor de transcripciĆ³n que se une a los promotores de genes CBF, de la misma forma que AtlCE1. EglCE1 es un regulador transcripcional, activando y reprimiendo los promotores de los genes CBFs en respuesta a bajas temperaturas.
Los niveles de transcritos de Eg/CE1 aumentaron en respuesta a condiciones de frĆo y sequĆa. El anĆ”lisis de expresiĆ³n de los genes rĆo abajo demostrĆ³ que la abundancia relativa de los mRNA de EgCBF1 aumentĆ³ sĆ³lo en respuesta a bajas temperaturas y no fue detectado en condiciones de sequĆa. Por otro lado, la abundancia relativa del gen EgRD29B disminuyĆ³ en respuesta a bajas temperaturas y aumentĆ³ en respuesta a sequĆa. Por otro lado, los niveles de proteĆna EgICE1 no variaron en las mismas condiciones. Sin embargo, se demostrĆ³ que EglCE1 se encuentra fosforilado tanto en frĆo, sequĆa y condiciones control.
Proponemos que existen eventos de desfosforilaciĆ³n implicados en la regulaciĆ³n post-traduccional en respuesta a condiciones de estrĆ©s, pero estro debe ser determinado experimentalmente
Notas
Tesis (Doctor en BiotecnologĆa)
Palabras clave
Eucalyptus globulus, Factores de TranscripciĆ³n