Implementación de nueva técnica para identificación de espermatozoides por microscopía robótica de fluorescencia, con orientación enzimática, en contenido vaginal, rectal y bucal

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Fecha
2009
Idioma
es
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Editor
Universidad Andrés Bello
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Licencia CC
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Resumen
El Servicio Médico Legal (SML) es la entidad pública encargado practicar la peritación de casos de interés judicial y asesorar a los Tribunales de Justicia y al Ministerio Público en materias médico-legales. Dentro de las pericias que se realizan en el SML los delitos sexuales son uno de los que adquieren mayor importancia dado que implican violencia y atentan contra la libertad sexual provocando serios problemas sicológicos. Con el fin de esclarecer los delitos sexuales, se realiza como prueba confirmatoria la búsqueda de espermatozoides. La dificultad de visualizar espermatozoides en matrices biológicas, radica en que muestras como contenidos vaginal, rectal y bucal aportan interferentes adicionales como: restos celulares, fecas, sangre, tierra, hongos, bacterias, etc. Actualmente, el SML utiliza para la determinación de espermios la tinción de Gram con la cual resulta dificultosa la visualización. El presente trabajo busca mejorar la visualización de espermatozoides por medio de microscopia robótica de fluorescencia (MRF) definiendo las condiciones experimentales requeridas (de tinción, visualización e identificación). Para realizar este trabajo se utilizan muestras provenientes de las áreas de Sexología y Tanatología del Servicio Médico Legal, de Santiago Chile de contenido bucal, rectal, vaginal. Se realizaron pruebas para la detección de fosfatasa ácida prostática; tinciones de Naranja de Acridina (NA) y Gram. Para la visualización de las imágenes se uso un Microscopio Robótico de Fluorescencia acoplado a un software para mejorar la profundidad de campo de las imágenes y computadores en línea con procesamiento de imágenes. La metodología de trabajo consistió en adaptar el método de Sivaram & Bami ocupado en prendas a contenidos biológicos para complementar y orientar resultados. Adicionalmente, se compararon las técnicas de tinción de Gram versus tinción Naranja de Acridina en cuanto a la visualización de espermatozoides y finalmente se definió un nuevo protocolo para tratamiento de muestras biológicas de delitos sexuales en la Unidad de Bioquímica y Criminalística
Notas
Tesis (Químico Farmacéutico)
Palabras clave
Espermatozoides, Análisis
Citación
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