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Plasticidad sináptica induce cambios en la metilación y la unión de la proteína MeCP2 al promotor del gen para reelina, en hipocampo de ratas

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dc.contributor.advisor Muñoz Carvajal, Carlos
dc.contributor.advisor Ardiles Araya, Álvaro
dc.contributor.author Ramírez Herrera, Oriana Marcela
dc.contributor.editor Facultad de Ciencias Biológicas
dc.contributor.editor Escuela de Ingeniería en Biotecnología
dc.date.accessioned 2017-10-31T13:57:17Z
dc.date.available 2017-10-31T13:57:17Z
dc.date.issued 2014
dc.identifier.uri http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/4514
dc.description Tesis (Ingeniero en Biotecnología) es_CL
dc.description.abstract Se ha considerado que la regulación génica a través de mecanismos epigenéticos tiene una importante función en la formación de plasticidad sináptica (PS) y memoria a largo plazo (MLP) (Levenson y Sweatt, 2005). La evidencia sugiere que el estado de metilación de algunos promotores de genes pasan por ciclos dinámicos (metilación/desmetilación) en la regulación de la transcripción , inducidos por actividad neuronal (Kangaspeska et al. , 2008; Métivier et al. , 2008). En neuronas, las metilaciones presentes en genes como el de reelina (RELN) son reconocidas por la proteína MeCP2, un miembro de la familia de proteínas de unión a sitios metii-CpGs, produciendo inhibición o activación de la transcripción , dependiendo de su interacción con factores ca-represores o co-activadores respectivamente (Chahrour et al. , 2008; Cohen et al ., 201 0). Debido a lo anterior, este estudio tiene como objetivo evaluar si el gen de RELN está sujeto a cambios en su estado de metilación durante el curso temporal de la potenciación a largo plazo (L TP). Se espera obtener una disminución del estado de metilación en la región promotora del gen para RELN, en respuesta a la potenciación a largo plazo y con ello una disminución de la unión de la proteína MeCP2 a dicha región . Para estudiar el estado de metilación de este gen, en rebanadas de hipocampo se establecerá una condición control y una tetanizada (L TP), en donde se modificará su ADN genómico con bisulfito, se evaluarán los cambios mediante la técnica de qPCR sensible a metilación, se determinará la unión de proteína MeCP2 a la región promotora del gen de RELN mediante la técnica de inmunoprecipitación de cromatina (ChiP), y por último, se cuantificará la expresión de RELN mediante la técnica de qRT-PCR. es_CL
dc.description.abstract Regulation of gene expression through epigenetic mechanisms has an important role in both the formation of synaptic plasticity (PS) and long-termmemory (L TM). Evidence suggests that the methylation status of sorne genes goes through dynamic cycles (methylation 1 demethylation) in the regulation of transcription induced neuronal activity. In neurons, the presence of methylation in genes such as reelin (RELN), are recognized by the MeCP2 protein , a member of the family of methyi-CpG of binding proteins, resulting in the inhibition or activation of gene transcription by interacting either with co -repressors or co-activators . Dueto the above, this study aims to assess whether the RELN gene may undergo acute changes in their methylation status during different stages of long-term potentiation (L TP). lt is expected to obtain a decrease in RELN methylation status, in response to long-term potentiation and thus a decrease MeCP2 binding to the prometer region . An assessment of the genomic DNA changes by methyl- sensitive PCR, a bisulfitebased technique, will be used to study the methylation status of the RELN gene in both control and tetanized (L TP) hippocampal slices. Finally, we will use chromatin immunoprecipitation (ChiP), to test MeCP2 binding to the prometer region of the gene, and we will quantify expression of RELN by the technique of qRT-PCR.
dc.language.iso es es_CL
dc.publisher Universidad Andrés Bello es_CL
dc.subject Sinapsis es_CL
dc.subject Metabolismo es_CL
dc.subject Memoria es_CL
dc.subject Aspectos Fisiológicos es_CL
dc.title Plasticidad sináptica induce cambios en la metilación y la unión de la proteína MeCP2 al promotor del gen para reelina, en hipocampo de ratas es_CL
dc.type Thesis es_CL


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