Desarrollo de nanopartículas fluorescentes biocompatibles para bioensayos en multiplex

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Fecha
2014
Profesor/a Guía
Idioma
es
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Editor
Universidad Andrés Bello
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Licencia CC
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Resumen
Las nanopartículas (NPs) también llamadas Quantum Dots (QDs) son partículas semiconductoras compuestas comúnmente por Cd, Se, S o Te, que emiten fluorescencia a diferentes longitudes de onda (A) dependiendo de su tamaño. Estas características, sumado a su alto rendimiento cuántico y fotoestabilidad, las hacen excelentes candidatos para el marcaje de biomoléculas por sobre fluoróforos orgánicos como las cianinas, especialmente en aplicaciones biomédicas. Desafortunadamente, su toxicidad ha limitado su uso en aplicaciones tecnológicas, especialmente aquellas relacionadas con el área de la biomedicina. En este sentido, existe creciente interés por el desarrollo de nuevos QDs con menor toxicidad, principalmente mediante su unión a biomoléculas como tioles que evitarían la formación de radicales libres. Hoy en día, existen al menos dos tipos de síntesis de QDs, una denominada orgánica y otra acuosa que permite obtener una mejor interacción con sistemas biológicos. Recientemente, nuestro grupo desarrolló una metodología de síntesis acuosa denominada "biomimética", que emula condiciones y sustratos encontrados en algunas bacterias permitiendo la producción de NPs solubles y con elevados niveles de biocompatibilidad. A pesar de estas ventajas, un problema asociado a esta síntesis es que los espectros de emisión de las NPs son muy anchos. Esto dificulta el uso de NPs de distinto tamaño en ensayos multiplex en los cuales se busca visualizar distintos colores presentes en una muestra, excitando a una única A. En este contexto, el objetivo de este trabajo fue obtener QDs cuyas emisiones permitan su uso en ensayos del tipo mu/tiplex. Para ello se evaluó una serie de metodologías para solucionar este problema, como la codificación de concentraciones de reactantes, orden de adición, temperatura o adición de moléculas con la capacidad de afinar las propiedades espectroscópicas (ciclodextrina), entre otras. Además, se caracterizó los espectros de fluorescencia, tamaño y biocompatibilidad de los QDs producidos mediante espectroscopía de fluorescencia, Dinamyc ligth scattering (DLS) y determinación de concentraciones mínimas inhibitorias (MICs), entre otras. 2
Notas
Tesis (Magister en Biotecnología)
Palabras clave
Nanopartículas, Puntos Cuánticos, Semiconductores de Juntura Ancha
Citación
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