Examinando por Autor "Galanti G., Norbel"

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    Incremento de la citotoxicidad al daño oxidativo del DNA en trypanosoma cruzi mediante la inhibición de la vía BER
    (Universidad Andrés Bello, 2009) Fernández Castro, Cristóbal Eduardo; Cabrera V., Gonzalo; Galanti G., Norbel; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Bioquímica
    Trypanosoma cruzi, el agente causal de la enfermedad de Chagas, es un protozoo hemoflagelado que presenta un ciclo de vida indirecto, con tres formas celulares: epimastigote (extracelular y replicativa) que se desarrolla en el intestino anterior del insecto vector; amastigote (intracelular y replicativo) y tripomastigote (extracelular no replicativo), estos últimos presentes en los hospederos definitivos mamíferos. T. cruzi es capaz de sobrevivir al daño oxidativo del DNA inducido por especies reactivas de oxígeno y nitrógeno (ROSIRNS) generadas por células del hospedero. La vía de reparación de este daño mediante escisión de bases (BER) es un proceso altamente conservado, siendo la proteína APEl fundamental. En consecuencia, se estudió la presencia de esta vía en el proceso de evasión al daño oxidativo en T. cruzi. Midiendo la viabilidad de epimastigotes de T. cruzi en presencia de peróxido de hidrógeno, se observó un importante incremento de la citotoxicidad en parásitos incubados posteriormente con el fármaco metoxiamina (inhibidor de la vía BER), comparado a los respectivos controles. Se concluye que la vía BER participa en la resistencia a daño oxidativo del DNA en T. cruzi. Para analizar la enzima principal de la vía BER en este parásito, se expresó la región carboxilo terminal de la proteína TcAP (APEl de T. cruzi) en E. coli. La proteína recombinante purificada se empleó para obtener anticuerpos policlonales específicos, los que fueron utilizados para observar la expresión de TcAP en T. cruzi, sometida a estrés oxidativo por H202 durante diferentes tiempos. Se concluye que la expresión de TcAP aumenta en función del tiempo de exposición a estrés oxidativo. La confirmación de la participación de la vía BER en la resistencia de T. cruzi al daño oxidativo del DNA mediante la activación de TcAP, haría factible la búsqueda de inhibidores farmacológicos específicos de TcAP que no afecten aAPEI de Homo sapiens.