Rol de residuos cargados de las porinas OmpD y OmpW de salmonella entérica serovar typhimurium en la expulsión de metil viológeno por simulación y mutagénesis

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Fecha
2008
Idioma
es
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Editor
Universidad Andrés Bello
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Licencia CC
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Resumen
Las porinas, proteínas de membrana externa de bacterias Gram negativo, clásicamente se definen como canales acuosos que permiten la difusión pasiva de moléculas desde el espacio extracelular al periplasma. Recientemente fue reportado que las porinas OmpD y Omp W de Salmonella entérica serovar Typhimurium (STm) funcionan como canales de salida de moléculas tóxicas, en particular de la sal de amonio cuaternario metil viológeno (MV). La expulsión de tóxicos a través de estos canales, es un mecanismo nuevo y poco caracterizado de resistencia bacteriana. En este trabajo de investigación, se utilizó la simulación molecular para estudiar las propiedades que permiten que las porinas OmpD y Omp W participen de este mecanismo de resistencia. In silico, se determinó que la porina OmpD tiene una estructura terciaria y un potencial electrostático que beneficia la expulsión de MV. Al mutar in silico los residuos K16 y D 1 07, las propiedades del canal se ven alteradas, sugiriendo que la bacteria, al expresar estas porinas, presentara una disminución de la resistencia a MV. Por otra parte, la estructura predicha para la porina menor OmpW tiene un canal estrecho, con residuos cargados (R9, E54, D141) que facilitarían el paso de MV hacia el espacio extracelular. In silico, la mutación del residuo R9 altera la estructura del canal, desfavoreciendo el paso de MV. Estas predicciones in silico, son comprobadas al observar las diferencias fenotípicas en la resistencia a MV, de cepas de STm, que expresan las proteínas mutantes OmpD D107Q, OmpDK16Q y OmpWR9A; estableciéndose adem~s, que los residuos mutados tienen un rol en las propiedades de estas porinas que permiten la expulsión de MV, desde el periplasma al espacio extracelular.
Notas
Tesis| (Bioquímica)
Palabras clave
Research Subject Categories::MEDICINE::Chemistry::Biochemistry, Porinas, Salmonella Typhimurium
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