Desarrollo de nanopartículas fluorescentes biocompatibles para bioensayos en multiplex
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Fecha
2014
Profesor/a Guía
Facultad/escuela
Idioma
es
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Editor
Universidad Andrés Bello
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Licencia CC
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Resumen
Las nanopartículas (NPs) también llamadas Quantum Dots (QDs) son partículas
semiconductoras compuestas comúnmente por Cd, Se, S o Te, que emiten
fluorescencia a diferentes longitudes de onda (A) dependiendo de su tamaño. Estas
características, sumado a su alto rendimiento cuántico y fotoestabilidad, las hacen
excelentes candidatos para el marcaje de biomoléculas por sobre fluoróforos orgánicos
como las cianinas, especialmente en aplicaciones biomédicas. Desafortunadamente,
su toxicidad ha limitado su uso en aplicaciones tecnológicas, especialmente aquellas
relacionadas con el área de la biomedicina. En este sentido, existe creciente interés por
el desarrollo de nuevos QDs con menor toxicidad, principalmente mediante su unión a
biomoléculas como tioles que evitarían la formación de radicales libres.
Hoy en día, existen al menos dos tipos de síntesis de QDs, una denominada
orgánica y otra acuosa que permite obtener una mejor interacción con sistemas
biológicos. Recientemente, nuestro grupo desarrolló una metodología de síntesis
acuosa denominada "biomimética", que emula condiciones y sustratos encontrados en
algunas bacterias permitiendo la producción de NPs solubles y con elevados niveles de
biocompatibilidad. A pesar de estas ventajas, un problema asociado a esta síntesis es
que los espectros de emisión de las NPs son muy anchos. Esto dificulta el uso de NPs
de distinto tamaño en ensayos multiplex en los cuales se busca visualizar distintos
colores presentes en una muestra, excitando a una única A.
En este contexto, el objetivo de este trabajo fue obtener QDs cuyas emisiones
permitan su uso en ensayos del tipo mu/tiplex. Para ello se evaluó una serie de
metodologías para solucionar este problema, como la codificación de concentraciones
de reactantes, orden de adición, temperatura o adición de moléculas con la capacidad
de afinar las propiedades espectroscópicas (ciclodextrina), entre otras. Además, se
caracterizó los espectros de fluorescencia, tamaño y biocompatibilidad de los QDs
producidos mediante espectroscopía de fluorescencia, Dinamyc ligth scattering (DLS)
y determinación de concentraciones mínimas inhibitorias (MICs), entre otras.
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Notas
Tesis (Magister en Biotecnología)
Palabras clave
Nanopartículas, Puntos Cuánticos, Semiconductores de Juntura Ancha