Regulación de la expresión de ompS2 de Salmonella enterica serovar Typhimurium bajo condiciones de estrés oxidativo
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Fecha
2012
Autores
Profesor/a Guía
Facultad/escuela
Idioma
es
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Editor
Universidad Andrés Bello
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Licencia CC
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Resumen
Salmonella enterica serovar Typhimurium (S. Typhimurium) es un patógeno de amplio rango de hospedero capaz de generar fiebre tifoidea en murino y gastroenteriris en humanos. Durante el proceso infectivo Salmonella es fagocitada por las células fagociticas, donde es sometida a diversos cambios medio ambientales y tipos de estrés, como el estrés oxidativo. Este es causado por una serie de especies reactivas de oxígeno (ROS), dentro de las cuales se incluyen el anión superóxido (O2), peróxido de hidrógeno (H2O2) u anión hipoclorito (OCI), los cuales son capaces de producir daño a macromoléculas, membranas, proteínas y DNA. Para poder resolver el entorno adverso generado por la presencia de ROS, la bacteria regula la expresión de distintos genes regulados a nivel transcripcional, que le ayudan a su supervivencia. Para regular la expresión genética la bacteria posee, entre otros mecanismos, con sistemas de dos componentes dentro de los cuales destaca el sistema arcAB. Este sistema se compone del sensor transmembrana del tipo histidina quinasa arcB, y del regulador de respuesta ArcA, controlando el paso del metabolismo aeróbico al anaeróbico modulando la expresión de una gran diversidad de genes. En los últimos años este sistema se ha relacionado con la resistencia de Salmonella y de otras enteribacterias a ROS causados por H2O2 y especies reactivas de nitrógeno (RNS). En este trabajo. presentamos evidencia que indica que el sistema de dos componentes ArcAB modula la expresión de la porina quiescente ompS2 en respuesta a OCI y H2O2. El tratamiento de la cepa silvestre con ambos tóxicos resultó en un aumento de los niveles del transcrito de ompS2 con respecto a células no tratadas. Un análisis bioinformático de la región promotora de este gen mostró la presencia de tres posibles sitios de unión del factor ArcA y por ensayos de interacción DNA-proteína (EMSA) utilizando la proteína ArcA purificada se demostró ésta interacción. La regulación positiva observada en la cepa silvestre no fue detectada en las cepas AarcA ni AarcB, lo que sugiere que el sistema ArcAB es requerido para la modulación de ña expresión de ompS2 frente a ROS. Adicionalmente, se realizaron ensayos de competencia de unión al promotor de ompS2 con ArcA y H-NS. ya que existe evidencia que H-NS regula negativamente la expresión de ompS2. Los resultados sugieren que el sistema de dos componentes ArcAB regula positivamente la expresión de la porina quiescente OmpS2 de S.Typgimurium frente a ROS compitiendo con el regulador negativo H-NS por la región promotora.
Notas
Tesis (Bioquímico, Magíster en Bioquímica)
Palabras clave
Salmonella Entérica, Virulencia