Zundert, Brigitte vanMartínez Contreras, Pablo Alberto2022-10-132022-10-132019https://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/24257Tesis (Doctor en Biociencias Moleculares)La esclerosis lateral amiotrófica (ELA) es una enfermedad neurodegenerativa causada por la pérdida progresiva de las motoneuronas(MNs) que lleva a la muerte del paciente entre 2 a 5 años después de la aparición de los primeros síntomas. Tipos celulares no moto neuronales, tales como astrocitos y músculo esquelético, contribuyen a la degeneración y muerte de MNs en ELA. Sin embargo, los mecanismos por los cuales estos tipos de células causan la toxicidad en MNs siguen sin conocerse. En esta tesis investigamos el rol del músculo esquelético en la degeneración y muerte de MNs en un modelo murino de ELA. Encontramos que medios condicionados de miotubos primarios de ratones hSOD1G93A (MCMSOD1G93A) reducen la sobrevida de MNs a través de la liberación de factores tóxicos solubles, gatilla una acumulación de ROSydec-Abl fosforilado, asociado a la degeneración de MNs en un modelo de cultivos primarios de neuronas de médula espinal ventral. Además, los factores tóxicos musculares presentes en el MCM-hSOD1G93A son capaces de generar distalmente un aumento de los eventos de calcio intracelulares, producción de ROS e interesantemente la muerte de MNs en un modelo de micro fluidos. Observamos también, que el MCM-hSOD1G93A produce un déficit funcional del transporte mitocondrial. Finalmente, existe una alteración en el patrón epigenético de miotubos, lo que se correlaciona con la expresión de factores tóxicos musculares. Como estrategia de identificación de los factores tóxicos liberados por el músculo esquelético en ELA establecimos un modelo in vivo de ELA en Drosophilamelanogaster, con expresión selectiva en el músculo de mutaciones en hSOD1. En estas moscas, vimos que la expresión de hSOD1A4V y hSO1G85R es suficiente para causar un déficit motor, similar a lo observado previamente en un modelo de ratón de la enfermedad. Los resultados de esta tesis establecen un nuevo mecanismo no autónomo celular, por el cuál la expresión de mutación es en hSOD1 en músculo esquelético causan la degeneración y muerte de MNs a través de la liberación de factores tóxicos solubles. Además, establecimos un modelo de ELA en moscas que nos permitirá identificar y evaluar la relevancia de posibles factores tóxicos musculares en la patogénesis de ELA.esEsclerosis Lateral AmiotróficaTesis