León González, GabrieGutiérrez Medina, Lilian NatalyFacultad de Ciencias BiológicasEscuela de Ingeniería en Biotecnología2017-05-052017-05-052017http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/3373Tesis (Magister en Biotecnología)En Arabidopsis, el desarrollo del estambre se divide en dos etapas con temporalidades distintas. La etapa temprana involucra una fase de formación y morfogénesis; mientras que la tardía consiste en tres procesos de desarrollo diferentes: la dehiscencia de la antera, la maduración del polen y la elongación del filamento. La interrupción de cualquiera de estos procesos resulta en esterilidad masculina, por lo que se trata de procesos esenciales para la productividad de muchas plantas. Se conoce que el gametofito masculino es un tejido que acumula auxina, hormona que participa en diferentes aspectos del desarrollo de la planta, pero se desconoce su rol en el caso del desarrollo del polen. Con el objetivo de entender mejor el rol que tiene la auxina durante el desarrollo del polen, se generaron plantas transgénicas de Arabidopsis thaliana que expresan el gen iaaL, que codifica para una proteína que es capaz de conjugar el IAA activo, generando una forma biológicamente inactiva de la hormona y, de esta forma, generando un tejido deficiente en auxina. El gen iaaL fue expresado exclusivamente en el polen, utilizando promotores con distintas temporalidades de expresión –que habían sido caracterizados previamente– para conocer si existe una ventana temporal durante el desarrollo del polen en la cual la acumulación de la hormona es de importancia. Las plantas resultantes presentaron polen no viable, elongación del filamento normal y no presentaron alteraciones funcionales en el proceso de dehiscencia. Además presentaron frutos más pequeños y con menor número semillas que las plantas silvestres. Por otro lado, algunas plantas mostraron ausencia de los estambres cortos y, en este último caso, se detectó además un menor desarrollo de las glándulas de néctar. Estos resultados sugieren que la auxina que se acumula en el polen durante su desarrollo (en la etapa floral 11) podría ser importante en la viabilidad del mismo; que los promotores podrían presentar actividad en la etapa temprana del desarrollo del estambre; y finalmente, reflejan la posible existencia de una relación entre la presencia del estambre corto y el desarrollo de la glándula de néctar lateral, apoyando modelo del flujo de auxina propuesto desde la antera a los otros tejidos florales.In Arabidopsis, the first phase of stamen development involves morphogenesis, histospecification and pollen mother cells generation. Later, during the late phase of stamen development, microspores go through a division process in the anther, producing mature pollen grains, stamen filaments elongate and the anther dehiscence occurs, releasing the pollen grains at anthesis. Interruption in any of this processes generate male sterility, affecting plant productivity. Male gametophyte is a tissue that accumulates auxin, this hormone has an important role in plant development but its role during pollen development remains poorly understood. To assess the contribution of auxin accumulated in pollen during its development, Arabidopsis thaliana transgenic plants were generated expressing the iaaL gene, which codificates for a protein capable of deplete active IAA, generating a biological inactive form of the hormone leading to an auxin deficient tissue. The iaaL gene was expressed in a pollen specific manner, using tissuespecific promoters previously characterized and also with different expression temporalities. To assess the contribution of auxin accumulated in pollen during the different stages of its development. The generated plants presented aborted pollen and smaller fruits with less seeds than the wild type. The process of anther dehiscence and filament elongation were normal. On the other hand, some plants showed absence of the short stamens, and when this was the case, the nectaries were underdeveloped. This results suggested that auxin accumulated during pollen development, possibly during intermediate stages (floral stage 11), might have a role during the pollen maturation, also that the selected promoters may present activity in early stages of stamen development. Finally this results suggest a link between short stamen presence and nectary gland development, supporting the auxin flow model proposed from the anther to other floral tissues.esBiotecnología VegetalGenética VegetalArabidopsis ThalianaTesis