Pacheco, RodrigoRosembatt, MarioGonzález Velozo, Hugo2021-01-222021-01-222013http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/17646Tesis (Doctor en Biociencias Moleculares)Evidencias recientes han demostrado que células T CD4+ infiltran en la substancia nigra en pacientes con enfermedad de Parkinson (EP), así como en modelos animales de la enfermedad. Estas células T CD4+ a través de sus fenotipos efectores inflamatorios promueven la activación microglial y contribuyen a la neurodegeneración de neuronas dopaminérgicas. La alteración de la expresión del receptor de dopamina D3 (D3R) en linfocitos de pacientes con EP ha sido correlacionada con la severidad de la enfermedad. Además, evidencias farmacológicas han asociado la estimulación de este receptor con la producción de IFN-y por células T CD4+humanas in vitro, citoquina involucrada en la estimulación y mantención de la respuesta glial proinflamatoria. En esta tesis se estudió el papel que juega el D3R expresado en células T CD4+ en la neurodegeneración dopaminérgica asociada a la EP utilizando un modelo murino de la enfermedad. Los resultados muestran que ratones deficientes en el D3R se encuentran significativamente protegidos de la pérdida neurona1 y la activación microglial inducidas por el tratamiento con 1 -methyl-4-phenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP). Notablemente, los ratones deficientes en el D3R recuperan la susceptibilidad a MPTP después de la transferencia de células T CD4+ purificadas de ratones normales. Además, ratones deficientes en la recombinasa RAGA, los cuales carecen de células T y que son resistentes a la neurodegeneración dopaminérgica inducida por MPTP, adquieren la susceptibilidad a MPTP cuando se les transfieren células T CD4+normales, pero no cuando se les transfieren células T CD4+ deficientes en D3R. Además, experimentos orientados a analizar el papel del D3R en la funcionalidad de las células T CD4+, revelaron que este receptor se acopla a señalización mediada por Gai y que favorece la activación celular y adquisición del fenotipo inflamatorio Thl. Así, los datos obtenidos en esta tesis indican que el D3R expresado en células T CD4+ juega un papel fundamental en la fisiopatología de la EP en un modelo animal.Emerging evidence has demonstrated that C04+ T cells infiltrate into the substantia nigra (SN) in Parkinson's disease (PO) patients and in animal models of PO. SN­infiltrated C04+ T cells bearing inflammatory phenotypes promote microglial activation and strongly contribute to neurodegeneration of dopaminergic neurons. lmportantly, altered expression of dopamine receptor 03 (03R) in peripheral blood lymphocytes from PO patients has been correlated with disease severity. Moreover, pharmacological evidence has suggested that 03R is involved in IFN-y production by human C04+ T cells. In this study, we examined the role of 03R expressed on C04+ T cells in the neurodegeneration of dopaminergic neurons in the SN using a mouse model of PO. Our results show that 03R-deficient mice are strongly protected against loss of dopaminergic neurons and microglial activation during 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6- tetrahydropyridine (MPTP)-induced PO. Notably, 03R-deficient mice became susceptible to MPTP-induced neurodegeneration and microglial activation upon transfer of wild-type (WT) C04+ T cells. Furthermore, RAG1 knockout mice (RAG1 KO), which are devoid of T cells and are resistant to MPTP-induced neurodegeneration, became susceptible to MPTP-induced loss of dopaminergic neurons when reconstituted with WT C04+ T cells, but not when transferred with 03R-deficient C04+ T cells. Moreover, experiments analyzing activation and differentiation of C04+ T cells revealed that 03R favors both T cell activation and acquisition of the Th1 inflammatory phenotype. These findings indicate that 03R expressed on C04+ T cells plays a fundamental role in the physiopathology of MPTP­induced PO in a mouse model.esEnfermedad de ParkinsonReceptores de DopaminaEstudio celularChileTesis