Alcayaga, FranciscaAdasme Vidal, Catalina AndreaFacultad de Ciencias de la VidaEscuela de Ingeniería en Biotecnología2023-09-042023-09-042023https://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/53012Tesis (Ingeniero en Biotecnología)El intestino es fundamental en el control de la salud humana, ya que las células epiteliales e inmunitarias intestinales están continuamente expuestas a una gran variedad de microorganismos, con efectos en la barrera epitelial intestinal y en la función inmunitaria local y sistémica. Dentro del intestino encontramos a una comunidad microbiana comensal. La microbiota intestinal se adquiere desde la microbiota vaginal de la madre, interactuando desde el período perinatal en la homeostasis intestinal y sistémica. Alteraciones en la microbiota intestinal pueden desencadenar distintos trastornos. La manera en que la microbiota intestinal contribuye en la etiopatogenia de estas enfermedades es algo que aún se desconoce, pero que ciertamente está siendo investigado por la comunidad científica. Las bacterias que componen la microbiota comensal secretan vesículas extracelulares (bEVs). Se sabe que estas bEVs median algunas de las funciones de la microbiota, transportando y entregando a las células inmunitarias moléculas efectoras capaces de modular distintas vías de señalización y procesos inmunes. Por ello, es que hoy se cree que las bEVs podrían ser agentes de comunicación entre la microbiota intestinal comensal y las células inmunes locales y sistémicas. Hoy sabemos fehacientemente que el tipo parto, vaginal o cesárea, determina la composición de la microbiota intestinal comensal de los recién nacidos. Esto debido a que durante el alumbramiento, niños nacidos por PV adquieren su microbiota desde el canal vaginal, mientras que los niños nacidos por PC la adquieren desde la piel de su progenitora. Sin embargo, se cree que el efecto que posee en la salud del recién nacido se modula por medio de las bEVs. Con los antecedentes presentados se plantea la siguiente hipótesis: “El tipo de parto influye en las características fenotípicas y el potencial inmunomodulador de vesículas extracelulares bacterianas (bEVs) derivadas de la microbiota intestinal comensal de los recién nacidos.”. De la hipótesis se planteó el objetivo general el cual es determinar el efecto del tipo de parto en la producción, en el fenotipo y propiedades inmunomoduladoras de las bEVs derivadas de la microbiota intestinal comensal de recién nacidos. Se utilizará como modelo de estudio las bEVs contenidas en heces obtenidas al tercer y al décimocuarto día de los recién nacidos por PV y PC, aisladas mediante centrifugaciones, ultracentrifugación y ultrafiltración, serán caracterizadas por columna de exclusión molecular (SEC) y western blot. Finalmente, se realizarán ensayos de inmunosupresión para evaluar el efecto de las bEVs sobre las células del sistema inmune. Tras el desarrollo de este estudio, esperamos encontrar una diferencia en el fenotipo de las bEVs aisladas de recién nacidos PV y PC, y que tengan un efecto proinflamatorio sobre las células del sistema inmune, además de obtener nuevos antecedentes sobre la composición de la microbiota de los recién nacidoThe gut is central to the control of human health, as intestinal epithelial and immune cells are continuously exposed to a wide variety of microorganisms, with effects on the intestinal epithelial barrier and on local and systemic immune function. Within the intestine we find a commensal microbial community. The intestinal microbiota is acquired from the vaginal microbiota of the mother, interacting from the perinatal period in the intestinal and systemic homeostasis. Alterations in the intestinal microbiota can trigger different disorders. The way in which the intestinal microbiota contributes to the etiopathogenesis of these diseases is still unknown, but is certainly being investigated by the scientific community. The bacteria that compose the commensal microbiota secrete extracellular vesicles (bEVs). These bEVs are known to mediate some of the functions of the microbiota, transporting and delivering to immune cells effector molecules capable of modulating different signaling pathways and immune processes. Therefore, it is now believed that bEVs could be agents of communication between the commensal intestinal microbiota and local and systemic immune cells. We now know that the type of delivery, vaginal or cesarean section, determines the composition of the commensal gut microbiota of newborns. This is because during delivery, infants born by PV acquire their microbiota from the vaginal canal, while infants born by CP acquire it from their mother's skin. However, it is believed that the effect on newborn health is modulated by bEVs. With the background presented, the following hypothesis is proposed: "The type of delivery, vaginal or cesarean section, influences the amount, phenotypic characteristics and immunomodulatory potential of bacterial extracellular vesicles (bEVs) derived from the commensal intestinal microbiota of newborns". From the hypothesis, the general objective is to determine the effect of type of delivery on the production, phenotype and immunomodulatory properties of bEVs derived from the commensal intestinal microbiota of newborns. The bEVs contained in feces obtained on the third and fourteenth day of newborns by PV and PC, isolated by centrifugation, ultracentrifugation and ultrafiltration, will be characterized by molecular exclusion column (SEC) and western blot. Finally, immunosuppression assays will be performed to evaluate the effect of bEVs on immune system cells. After the development of this study, we expect to find a difference in the phenotype of bEVs isolated from PV and PC neonates, and that they have a proinflammatory effect on immune system cells, as well as to obtain new background on the composition of the microbiota of neonates.esRecién NacidoMicrobiota IntestinalAnálisisVesículas ExtracelularesTesis