Blanco Herrera, María FranciscaHerrera Vásquez, ArielZavala Torres, DiegoFacultad de Ciencias de la Vida2021-07-192021-07-192020http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/19425Tesis (Magíster en Biotecnología y Ciencias de la Vida)Esta tesis fue financiada por el proyecto FONDECYT Regular 1170259. También agradezco al Center of Applied Ecology and Sustainability (CAPES) y a ANID PIA/BASAL FB0002 por el financiamiento.Las plantas han desarrollado sofisticados mecanismos para defenderse de patógenos por medio del reconocimiento de moléculas presentes en la superficie de estos o que son inyectadas al citoplasma de la célula vegetal. Uno de los modelos más utilizados para el estudio de la interacción plantapatógeno incluye a la planta de Arabidopsis thaliana como hospedero y la bacteria Pseudomonas syringae pv. tomato DC3000 (Pst DC3000) como patógeno. A pesar de que A. thaliana no es hospedero natural de Pst DC3000, este modelo ha sido fundamental en la comprensión de las bases moleculares de la respuesta de defensa vegetal. Un estudio reciente, reportó una nueva cepa denominada Pseudomonas syringae RAYR-BL (Psy RAYR-BL) aislada desde accesiones de Arabidopsis y descrita como altamente infecciosa en estas plantas. Para explicar la severa enfermedad producida por esta cepa, nuestro laboratorio realizó la secuenciación y análisis de su genoma. A pesar de la presencia del repertorio completo de genes que codifican para componentes de un sistema de secreción de tipo III (T3SS), la cepa Psy RAYR-BL tiene un número disminuido de efectores tipo III (T3E) en comparación a la Pst DC3000, los cuales son necesarios para la virulencia P. syringae. En esta tesis, se buscó analizar la contribución de los T3E a la virulencia de la Psy RAYR-BL durante su interacción con hospederos susceptibles. Interesantemente, Psy RAYR-BL posee un putativo T3E que no está presente en la cepa Pst DC3000, al que llamamos HopBJ1-like, por su similitud al ya descrito efector HopBJ1 reportado como importante para la virulencia de una cepa de Pseudomonas capaz de infectar plantas de Nicotiana benthamiana. Observamos que la cepa Psy RAYR-BL no solo genera síntomas de enfermedad en accesiones naturales de Arabidopsis, sino que también en las plantas A. thaliana del ecotipo Columbia-0 (Col-0) y en plantas de N. benthamiana, donde los síntomas en ambas especies vegetales van acompañados de una acumulación de H2O2 y un incremento en la proliferación de la bacteria en el tejido. Además, la expresión de HopBJ1-like se induce bajo tratamientos que promueven la virulencia de P. syringae. Por otro lado, la expresión de HopBJ1-like indujo lesiones necróticas en hojas de N. benthamiana, lo que sugiere que este T3E altera de alguna manera el funcionamiento celular, lo cual conduce al colapso del tejido. En conjunto, estos resultados indican que Psy RAYR-BL posee un rango de hospederos que no solo incluye a accesiones naturales de Arabidopsis geográficamente cercanas en donde fue aislada, sino que también a plantas de A. thaliana Col-0 y a plantas de N. benthamiana. Además, su virulencia posiblemente está determinada por la presencia del efector HopBJ1-like, el cual podría estar contribuyendo positivamente a su patogénesis.esArabidopsis ThalianaBiotecnología VegetalPseudomonasTesis