Aguilar Maureira, Rodrigo Agustín.Leiva Mena, Diego Alonso.Facultad de Ciencias de la Vida.2025-04-032025-04-032023https://repositorio.unab.cl/handle/ria/63969Tesis (Licenciado en Biología)Los ARNs largos no codificantes (lncRNAs) son transcritos que permanecen generalmente en el núcleo. La desregulación de éstos transcritos está relacionado a enfermedades. Entre los lncRNAs hay un transcrito llamado MALAT1, el cuál desde su descubrimiento hace 20 años, ha sido encontrado sobreexpresado en docenas de tipos de cánceres distintos. Se ha localizado clásicamente a MALAT1 en el núcleo, sin embargo, un estudio reciente evidenció por medio de RNA-FISH que existe una localización aberrante de MALAT1 en las mitocondrias de la línea celular hepatocarcinoma HepG2. En esta tesis, se investiga la localización subcelular de MALAT1 en modelos de cáncer gástrico (células AGS) y de tiroides (células TPC1), hipotetizando que, en estas células, una fracción de los transcritos del lncRNA MALAT1 se localiza fuera del núcleo. Primero se realizó hibridación in situ fluorescente (RNA-FISH) para detectar MALAT1. Los resultados revelan que la población con localización de MALAT1 fuera del núcleo ascienden a un 10% en células de cáncer gástrico y 6% en células de cáncer de tiroides. Luego analizamos los niveles de transcrito de MALAT1 en extractos de RNA provenientes de fracciones subcelulares de las líneas celulares estudiadas, encontrando MALAT1 predominantemente en el núcleo de células de cáncer de tiroides, pero niveles comparables entre el citoplasma y núcleo de células de cáncer gástrico. Nuestros resultados abren puertas a la posibilidad que en una subpoblación de células cancerosas (especialmente en modelo de AGS de cáncer gástrico) MALAT1 pueda estar ejecutando funciones fuera del clásico contexto nuclearLong non-coding RNAs (lncRNAs) are transcripts that generally remain in the nucleus. The deregulation of these transcripts is related to diseases. Among the lncRNAs is a transcript called MALAT1, which since its discovery 20 years ago, has been found overexpressed in dozens of different types of cancers. MALAT1 has classically been localized in the nucleus, however, a recent study showed through RNA-FISH that there is an aberrant localization of MALAT1 in the mitochondria of the hepatocarcinoma cell line HepG2. In this thesis, the subcellular localization of MALAT1 was investigated in gastric cancer AGS cells and thyroid cancer TPC1 cells, hypothesizing that, in these cells, a fraction of the lncRNA MALAT1 transcripts is located outside the nucleus. Fluorescent in situ hybridization (RNA-FISH) was first performed to detect MALAT1. The results reveal a localization of MALAT1 outside the nucleus in 10% of gastric cancer cells and 6% of thyroid cancer cells. Next, we analyzed MALAT1 transcript levels in RNA extracts from subcellular fractions of the cell lines studied, finding MALAT1 predominantly in the nucleus of thyroid cancer cells, but comparable levels between cytoplasm and nucleus in gastric cancer cells. Our results open doors to the possibility that in a subpopulation of cancer cells (especially in the AGS model of gastric cancer) MALAT1 may be executing functions outside the classic nuclear contextesARNCáncer GástricoCáncer de TiroidesGenéticaInvestigaciones.Tesis