Díaz Franulic, Ignacio AntonioVerdugo Escaff, Christian AndrésFacultad de Ciencias de la Vida2023-04-202023-04-202022https://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/48838Tesis (Magíster en Biotecnología y Ciencias de la Vida)Los canales iónicos de la familia TRP son un grupo de receptores polimodales que se pueden activar por estímulos como voltaje, ligando y temperatura, denominándose estos últimos termoTRP. Dentro de los termoTRP se encuentra la subfamilia TRPM, la cual incluye canales sensibles al frío (TRPM8) y a calor (TRPM4-5). Actualmente, está descrito que el extremo carboxilo terminal es el sensor de temperatura del canal TRPM8, el cual es un sensor de frio. Sin embargo, el mecanismo mediante el cual los canales TRPM activados por calor responden a estímulos térmicos sigue siendo desconocido. Con el objeto de evaluar el rol del extremo carboxilo terminal en la activación por calor del canal TRPM4 se generó un mutante del canal que carecía de los últimos 84 aminoácidos (TRPM4∆84) y se caracterizó por medio de la técnica de patch clamp. Nuestros resultados muestran que el canal TRPM4∆84 es insensible a temperatura, lo que sugiere que la estructura responsable de sensar el calor se encuentra contenida en estos 84 aminoácidos. Adicionalmente, mediante el uso de aminoácidos no naturales se demostró que el dominio coiled coil experimenta cambios conformacionales dependientes de temperatura. Interesantemente este dominio sufre procesos de plegamiento y desplegamiento en las regiones proximales y distales, respectivamente, evidenciando que los últimos 84 aminoácidos del coiled coil del carboxilo terminal son claves para la activación por calor del canal TRPM4.esCanales IónicosTesis