Villota Arcos, ClaudioCampos González, América VanessaFacultad de Ciencias BiológicasEscuela de Bioquímica.2021-02-102021-02-102011http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/17933Tesis (Bioquímico, Magíster en Bioquímica)Nuestro grupo ha descrito una familia de RNAs no codificantes de origen mitocondrial (ncrntRNAs) que exhiben un patrón de expresión diferencial de acuerdo al estado proliferativo. Células normales en proliferación expresan dos transcritos, denominados sentido (SncrntRNA) y antisentido (ASncrntRNA). Mientras que células tumorales expresan el SncrntRNA, pero regulan negativamente la expresión del ASncrntRNA. De manera de explorar los mecanismos involucrados en la baja expresión de este transcrito durante transformación celular hemos utilizado como modelo, queratinocitos inmortalizados con el virus papiloma humano (HPV) tipo 16 y 18, en donde encontrarnos que el patrón de expresión de los ncrntRNAs es el mismo que en células tumorales. Previamente se estableció que las oncoproteínas, E6 y E7 de HPV no son capaces de inducir la baja expresión del ASncrntRNA. Este resultado nos abrió camino para evaluar la participación de las oncoproteínas E5, E4 y E2 en la baja expresión del ASncrntRNA. Encontrarnos que el silenciarniento de E5 realizado con shRNA en células inmortalizadas, no generó cambios en la expresión del ASncrntRNA. Sin embargo, el silenciamiento de E4 restableció la expresión del ASncrntRNA, pero, contrario a lo que esperábamos, la expresión exógena de E4 en queratinocitos normales no tuvo efecto sobre la expresión del ASncrntRNA. Lo que nos llevó a evaluar el rol de E2, cuyo rnRNA también es silenciado con shRNAE4. Concordante con la hipótesis, cuando silenciamos E2 en líneas inmortalizadas, se obtuvo un restablecimiento del ASncrntRNA. Lo que sugiere un rol para E2 de HPV de alto riesgo en la baja expresión del ASncrntRNA en una etapa temprana de inmortalización celular.esPapillomavirusTesis