Evaluación de cinco modificaciones de la técnica de Gram para la identificación de bacterias en tejido sometidos a procesamiento histológico de rutina
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Fecha
2008
Profesor/a Guía
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Idioma
es
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Editor
Universidad Andrés Bello
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Licencia CC
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Resumen
La tinción de Gram se usa como orientación en el diagnóstico y clasifica a las
bacterias en dos grandes grupos según reaccionen a la tinción: Gram positivo y Gram negativo,
convirtiéndola así en una importante herramienta taxonómica y diagnóstica.
En este trabajo se evaluaron cinco modificaciones a la técnica de Gram para la
identificación de bacterias en muestras de tejido humano fijado en formalina e incluido en
parafina: Hucker y Conn, Mc Callum - Goodpasture, Brown y Brenn, Jensen y Taylor. Se
utilizaron cortes de 4um de 20 muestras de tejido con diagnósticos positivos para bacterias
Gram positivo y Gram negativo. Se realizaron las 5 modificaciones a evaluarlas en cada una
de muestras. Se utilizaron controles positivos externos de cultivos frescos de bacterias y
muestra histológica con bacterias.
Las láminas fueron evaluadas por 4 observadores en ciego, considerando los
parámetros de detectabilidad e identificación de bacterias; donde se evalúo la morfología
bacteriana, intensidad de la tinción y cantidad de bacterias.
El método Hucker y Conn, es el que presentó mayor cantidad de muestras con óptima
detectabilidad de bacterias (60%), además permitió su realización en borrel una vez que se
estandarizaron los tiempos de tinción y diferenciación, produciendo un ahorro sustancial de
tiempo a la hora de teñir varias láminas y evitando el problema de coloración dispareja que
produce la tinción en placa. La técnica Brown y Brenn, fue la segunda mejor evaluada en
detectabilidad e intensidad de la tinción. El buen resultado de ambas técnicas, no es atribuible
a la concentración de cristal violeta utilizado, sino al uso de oxalato de amonio (Hucker y
Conn) y bicarbonato de sodio (Brown-Brenn) que le otorgan un pH alcalino a la solución,
estabilizándola y logrando una mejor tinción de las bacterias Gram positivo. Los métodos
Jensen y Taylor, fueron los únicos que mostraron resultados con tinción inadecuada.
Notas
Tesis (Tecnólogo Médico con especialidad en Morfofisiopatología y Citodiagnóstico)
Palabras clave
Tinción de Gram, Bacterias Gram positivo y negativo, Evaluación de diagnóstico, Chile