Efecto del ion cobre sobre la funciĆ³n mitocondrial durante la eritropoyesis

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Fecha
2014
Profesor/a GuĆ­a
Idioma
es
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Editor
Universidad AndrƩs Bello
Nombre de Curso
Licencia CC
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Resumen
Las mitocondrias juegan un rol importante en las cĆ©lulas al controlar la vida de Ć©stas y de los organismos. Proveen el ATP y participan en diversas vĆ­as metabĆ³licas. TambiĆ©n controlan la muerte mediante la apoptosis y la generaciĆ³n de radicales libres. Las mitocondrias son las que sintetizan el hemo, vital para la sĆ­ntesis de hemoglobina y transporte de 02. El hemo se genera durante la eritropoyesis y requiere del ion hierro el cual debe ser internalizado por las mitocondrias. Otro metal traza importante en la fisiologĆ­a celular es el cobre, forma parte, entre otros, del complejo IV de la cadena transportadora de electrones mitocondrial y de la enzima superĆ³xi~o dismutasa l. Ambas son necesarias para la eritropoyesis. La primera en la generaciĆ³n del potencial de membrana para la sĆ­ntesis de ATP; y la segunda para detoxificar el estrĆ©s oxidativo generado durante la eritropoyesis. El cobre es un metal reactivo y en estado libre genera estrĆ©s oxidativo. Se ha demostrado que en lĆ­neas celulares, el cobre es capaz de modificar la proliferaciĆ³n y la diferenciaciĆ³n celular, ademĆ”s de potenciar el crecimiento tumoral y la angiogĆ©nesis. La sobrecarga y carencia de este metal traza conlleva a patologĆ­as, entre ellas, la anemia. Hipotetizamos que la sobrecarga de cobre altera la fisiologĆ­a mitocondrial y por tanto, la progresiĆ³n de la eritropoyesis. Para contestar esta hipĆ³tesis, se realizaron estudios in vitro con la lĆ­nea celular eritropoyĆ©tica K562 e in vivo en ratones C57 Black. La lĆ­nea celular fue expuesta a concentraciones crecientes de cobre (0-200uM) por 48 hrs, lo cual produjo variaciones en la tasa de proliferaciĆ³n. Por otra parte, a los ratones se les administrĆ³ 300 ppm de cloruro de cobre a travĆ©s del agua que beben, lo cuĆ”l alterĆ³ el proceso eritropoyĆ©tico en la mĆ©dula Ć³sea. La funciĆ³n mitocondrial fue evaluada mediante el uso de tinciones especĆ­ficas para el potencial de membrana mitocondrial (TMRE) y para la detecciĆ³n del radical superĆ³xido (Mitosox). AdemĆ”s, se midiĆ³ el consumo de oxĆ­geno con la tecnologĆ­a Seahorse. Se observĆ³ que 95 uM de sobrecarga de cobre estimula la proliferaciĆ³n de las cĆ©lulas K562 y disminuye su capacidad de diferenciaciĆ³n. En el caso de los ratones, se alterĆ³ la eritropoyesis y el nĆŗmero de reticulocitos. El potencial de membrana mitocondrial disminuyĆ³ y el estrĆ©s oxidativo aumentĆ³, asociados a un aumento en la respiraciĆ³n basal, asĆ­ mismo como en la eficiencia en la sĆ­ntesis de ATP.
Notas
Tesis (Magister en BiotecnologĆ­a)
Palabras clave
Iones, Compuestos OrgƔnicos de Cobre, Eritropoyesis
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