Examinando por Autor "Dettleff, Phillip"
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Ítem Evaluación del efecto del estrés por manejo en la expresión de 1nCRNA y mRNA en Genypterus chilensis(Universidad Andrés Bello, 2019) Hormazábal Meléndez, Elizabeth Andrea; Valdés, Juan Antonio; Dettleff, Phillip; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Ingeniería en BiotecnologíaLos Long Non Coding RNAs (lnCRNAs) son moléculas que han sido descritas en una gran variedad de organismos y se ha visto que afectan la expresión génica por mecanismos que aún no han sido descritos totalmente. Diversos estudios han identificados que estos son capaces de regular variados procesos celulares, muchos de ellos bajo condiciones de estrés. Sin embargo, a la fecha no existe información de la influencia de los lncRNA en la homeostasis de congrio colorado [Genypterus chilensis], una especie candidata para la diversificación de la producción acuícola chilena. En este estudio se evaluaron genes asociados a los procesos de crecimiento y proteólisis en músculo, y de oxidación/reducción y metabolismo de lípidos en hígado de Genypterus chilensis juvenil. Para ello, se sometió un grupo de peces a un protocolo de estrés por manejo mientras que otro grupo sin estrés se utilizó como control. Como resultado se obtuvo una expresión diferencial en dos genes evaluados, los cuales correspondieron a mvd y psmDll relacionados al proceso de metabolismo de lípidos y proteólisis, respectivamente. Por otra parte se estableció una alta correlación entre los lncRNA y sus genes blancos, tanto en músculo como en hígado. Sin embargo, en este último se encontró que el gen ndua presentó una alta correlación, sugiriendo que posiblemente este gen estaría siendo regulado por mecanismos independientes a los 1ncRNAs. Por otra parte, al analizar la estabilidad de distintos genes normalizadores en Genypterus chilensis, se encontró que tmub y Taf12 son los más estables Los resultados de este trabajo sugieren que los lncRNA estarían regulando de alguna manera la expresión de genes blancos bajo condiciones de estrés, mediante mecanismos que aún no se pueden determinar. Sin embargo, estos hallazgos dan pie para futuras investigaciones sobre el efecto de los IncRNAs en esta especie, los cuales permitan aportar más sobre la importancia de estas moléculas y su efecto en los mensajeros blancos bajo condiciones de estrés en juveniles Genypterus chilensis.Ítem High-Temperature Stress Induces Autophagy in Rainbow Trout Skeletal Muscle(Multidisciplinary Digital Publishing Institute (MDPI), 2023-06) Molina, Alfredo; Dettleff, Phillip; Valenzuela-Muñoz, Valentina; Gallardo-Escarate, Cristian; Valdés, Juan AntonioEctothermic animals, such as teleosts, have increasingly been exposed to stressful high-temperature events due to global warming. Currently, the effects of thermal stress on skeletal muscle, a key tissue for fish growth, are unknown. This study examined the impact of high-temperature stress on the skeletal muscle transcriptome of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) in control (15 °C) and high-temperature (20 °C) conditions. Additionally, we examined the plasmatic levels of cortisol, glucose, and creatine kinase activity, and examined oxidative damage and autophagy activation in skeletal muscle. High-temperature stress induced significant increases in cortisol and glucose plasmatic levels. Nevertheless, no changes were observed in creatine kinase activity in plasma and skeletal muscle oxidation. Skeletal muscle RNA was isolated and sequenced using the HiSeq Illumina platform. A total of 383,796,290 reads were mapped onto the reference rainbow trout genome. The transcriptomic analysis showed that 293 genes were upregulated in the high-temperature group, mainly associated with autophagosome assembly, amino acid transport, and the glutamine metabolic process. On the other hand, 119 genes were downregulated in the high-temperature group, mainly associated with digestion, proteolysis, and the muscle contraction process. In addition, RT-qPCR of differentially expressed representative genes and Western blot analysis of LC3-II/LC3-I levels confirmed skeletal muscle autophagy induced by high temperature. This study sheds light on intriguing facets of the adaptive response of rainbow trout skeletal muscle to high-temperature stress and provides significant insights into the physiology of autophagy in teleosts.Ítem High‐Temperature Stress Effect on the Red Cusk‐Eel (Geypterus chilensis) Liver: Transcriptional Modulation and Oxidative Stress Damage(MDPI, 2022-06) Dettleff, Phillip; Zuloaga, Rodrigo; Fuentes, Marcia; Gonzalez, Pamela; Aedo, Jorge; Estrada, Juan Manuel; Molina, Alfredo; Valdés, Juan AntonioEnvironmental stressors, such as temperature, are relevant factors that could generate a negative effect on several tissues in fish. A key fish species for Chilean aquaculture diversification is the red cusk‐eel (Genypterus chilensis), a native fish for which knowledge on environmental stressors effects is limited. This study evaluated the effects of high‐temperature stress on the liver of red cusk‐eel in control (14 °C) and high‐temperature (19 °C) groups using multiple approaches: determination of plasmatic hepatic enzymes (ALT, AST, and AP), oxidative damage evaluation (AP sites, lipid peroxidation, and carbonylated proteins), and RNA‐seq analysis. High-temperature stress generated a significant increase in hepatic enzyme activity in plasma. In the liver, a transcriptional regulation was observed, with 1239 down‐regulated and 1339 up‐regulated transcripts. Additionally, high‐temperature stress generated oxidative stress in the liver, with oxidative damage and transcriptional modulation of the antioxidant response. Furthermore, an unfolded protein response was observed, with several pathways enriched, as well as a heat shock response, with several heat shock proteins up regulated, suggesting candidate biomarkers (i.e., serpinh1) for thermal stress evaluation in this species. The present study shows that high-temperature stress generated a major effect on the liver of red cusk‐eel, knowledge to consider for the aquaculture and fisheries of this species. © 2022 by the authors. Licensee MDPI, Basel, Switzerland.