Examinando por Autor "Feijóo, Carmen Gloria"
Mostrando 1 - 3 de 3
Resultados por página
Opciones de ordenación
Ítem Análisis de la modulación de la respuesta inmune innata y respuesta a estrés por la presencia de los antibióticos florfenicol y oxitetraciclina en el medio en pez cebra(Universidad Andrés Bello, 2013) Barros Becker, Francisco Alberto; Feijóo, Carmen Gloria; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Ingeniería en BiotecnologíaEl uso exces1vo de antibióticos en la acuicultura afecta no solo al medio ambiente, sino también a los peces que son tratados con ellos. Existe evidencia de que algunos antibióticos modulan la respuesta inmune, pudiendo de esta forma tener efectos adversos en los peces. La oxitetraciclina y el florfenicol son los antibióticos de mayor uso en la acuicultura en Chile. Por su parte, Chile es a su vez es el segundo productor a nivel mundial de salmónidos, y es el que mayor cantidad de estos compuestos utiliza a nivel mundial en acuicultura. Usando al pez cebra como modelo, se desarrolló un análisis cualitativo y cuantitativo de los efectos que genera la exposición a estos dos antibióticos, por separado y en mezcla, disueltos en el medio. Nuestros resultados mostraron que la exposición a el antibiótico oxitetraciclina genera un intenso proceso inflamatorio, que se manifiesta en una importante migración de neutrófilos desde el tejido caudal hematopoyético a tejidos periféricos, y que progresa a medida que la exposición a la droga continúa. Dicho proceso no habría sido gatillado por la muerte celular detectada en los peces tratados con oxitetraciclina. La inflamación también fue confirmada mediante un análisis molecular por qPCR. Los marcadores de inflamación il-1 f3 y mpx , así como el marcador de estrés oxidativo cyp1 a, se encontraron elevados en aquellas larvas expuesta a oxitetraciclina. Por último, la inflamación provocada por la exposición a dicho antibiótico aumentó la sobrevivencia de larvas en un desafío con bacterias que comúnmente infectan a peces, sugiriendo que la oxitetraciclina podría estar actuando como inmunoestimulante. Además, la inflamación provocada por este antibiótico aumenta la capacidad regenerativa de las células ciliadas de la línea lateral posterior. Por su parte, florfenicol no generó ninguna respuesta inflamatoria. Así mismo, ninguno de los antibióticos fue capaz de generar una respuesta de estrés en las larvas. Estos resultados entregan valiosa información sobre los efectos que ambos antibióticos, disueltos en el agua, pueden generar en los peces. En Chile este tipo de conocimiento es de gran valor debido al importante desarrollo de la industria acuícola y el gran uso de antibióticos que ésta hace.Ítem Caracterización del gen yhjA y su contexto génico en la defensa durante estrés oxidativo frente a Fe3+ o H2O2 en Leptospirillum rubarum(Universidad Andrés Bello, 2013) Zapata Rojas, Claudia Andrea; Feijóo, Carmen Gloria; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Ingeniería en BiotecnologíaLa biolixiviación es un proceso que permite la recuperación de metales desde minerales sulfurados gracias a la acción de microorganismos, los cuales juegan un rol indirecto regenerando el ion Fe3 + necesario para la solubilización de los metales. En este proceso, los miembros del género Leptospirillum son importantes debido a su capacidad para oxidar ión ferroso (Fe2+) a ión férrico (Fe3+). Los miembros de este género y otras bacterias biolixiviantes están usualmente expuestas a condiciones altamente oxidantes, causadas principalmente por altas concentraciones de hierro y otros metales, y pHs extremadamente bajos ( <1 ). Estas condiciones pueden favorecer la generación de especies reactivas de oxígeno (ROS), como el peróxido de hidrógeno (H20 2), superóxido (02") y el radical hidroxilo (Olf), las cuales pueden inducir estrés oxidativo a los microorganismos. Adicionalmente, las bacterias oxidantes de hierro poseen elevadas tasas respiratorias que también pueden favorecer la generación de ROS. Todos estos factores pueden afectar la actividad y sobrevivencia de los microorganismos, no obstante, los mecanismos que ayudan a mantener la homeostasis redox de estas bacterias son muy poco conocidos. Con el objetivo de conocer los elementos moleculares involucrados en la respuesta antioxidante de Leptospirillum rubarum se realizó un análisis bioinformático, que reveló la presencia de genes codificantes para peroxidasas, enzimas que constituyen una barrera de protección frente a H20 2. El gen yhjA codifica para una citocromo e peroxidasa (CcP) y se localiza contiguamente a los genesfur y prx que codifican para un regulador de la homeostasis de hierro y una peroxirredoxina, respectivamente. Mediante RT -PCR se determinó que estos genes se ce-transcriben, incluyendo además al gen adr que codifica para una acireductona dioxigenasa, conformando así al denominado "operón ccp". Un análisis de RT-qPCR reveló que estos genes del operón incrementan levemente su expresión en células expuestas a estrés oxidativo por Fe3+ o H20 2 . Adicionalmente un análisis de actividad de la enzima CcP en extractos celulares de L. rubarum reveló que la enzima es funcional in vivo y que su actividad incrementa significativamente al inducir estrés oxidativo con Fe3+ o H20 2. Los resultados obtenidos sugieren que CcP constituye un elemento de respuesta frente a estrés oxidativo y que su actividad podría estar regulada a nivel transcripcional por Fe3+ o H20 2 intracelular.Ítem Detección de especies del género Vibrio asociados a intoxicaciones alimentarias desde muestras de moluscos bivalvos mediante macro arreglo molecular(Universidad Andrés Bello, 2011) Ferreira Soto, Nicolás; Feijóo, Carmen Gloria; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Ingeniería en BiotecnologíaLas bacterias pertenecientes al género Vibrio son bacilos Gram negativo halofilicos que habitan en los ambientes marinos a lo largo de todo el mundo. Dichas bacterias han sido descritas mundialmente asociadas a intoxicaciones alimentarias, dado el consumo crudo de productos marinos contaminados. Actualmente en Chile, para la detección de cada una de las especies de Vibrios presentes en una muestra de alimento, se utilizan las metodologías tradicionales recomendadas por la United States Food and Drug Administration (US FDA), que consisten en la detección del microorganismo usando pruebas bioquímicas y cultivos microbiológicos. El uso de estas técnicas se ve limitado por el tiempo y trabajo que es necesario para su aplicación. Se han descrito otros métodos para la detección de diversas especies del género Vibrio, como el uso del PCR convencional y PCR en tiempo real, sin embargo estos resultan efectivos para la detección de un bajo número de muestras, debido a la existencia de limitantes técnicas. Las técnicas basadas en hibridaciones de ácidos nucleicos han sido descritas como metodologías viables para la detección de las bacterias que se encuentran inmersas en muestras de origen ambiental, tales como aguas, suelos y/o alimentos, las que contienen una gran biodiversidad de microorganismos. Estos tipos de técnicas son capaces de detectar y diferenciar específicamente y de manera simultánea las diversas especies bacterianas presentes en una muestra ambiental. Dentro de estas técnicas están los llamados macro arreglos moleculares, en los que un ADN complementario a una secuencia específica para un microorganismo se encuentra adherido a una matriz y que al reconocer su ADN blanco, bajo un mecanismo molecular dado, es capaz de emitir una señal que indica la detección específica de una especie dentro de la muestra. El uso de los macro arreglos moleculares con el propósito de detección ha tomado fuerza dado a su relativo bajo costo y su capacidad de detectar simultánea y específicamente diversas especies bacterianas en una misma muestra. En esta tesis se busca analizar la capacidad de un macro arreglo molecular para detectar las bacterias del género Vibrio asociados a intoxicaciones alimentarias a partir del análisis de cepas de referencia y muestras ambientales de moluscos bivalvos extraídos en períodos estivales.