Examinando por Autor "Grant Grant, Susana Margarita"

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    Efecto del primer intrón del gen EVP1 de Eucalyptus globulus sobre la expresión del gen reportero GUS en Arabidopsis thaliana
    (Universidad Andrés Bello, 2016) Grant Grant, Susana Margarita; Gamboa Garrido, María Cecilia; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Ingeniería en Biotecnología
    En Chile la industria forestal es la segunda industria más importante en relación al PIB nacional, representando E. globulus el 21% de las especies plantadas comercialmente. En la actualidad, la disponibilidad de sitios óptimos para su plantación es baja, es por esto que los suelos ubicados en el norte de Chile pueden ser una alternativa. Sin embargo, estos suelos se caracterizan por una alta salinidad y baja disponibilidad de agua. El sodio es tóxico para la planta si alcanza altas concentraciones intracelulares. Una forma por la cual la célula resiste altas concentraciones de sodio es a través de su compartimentalización en la vacuola utilizando una gradiente de protones. Existen dos proteínas claves para la generación de esta gradiente, la H+-ATPasa vacuolar y la H+-pirofosfatasa vacuolar. En relación a la H+-pirofosfatasa ha sido reportado que su sobreexpresión aumenta la tolerancia a estrés osmótico y salino. Nuestro laboratorio ha aislado el gen de H+-pirofosfatasa vacuolar de E. globulus (EVP1). La estructura génica presenta una región promotora de alrededor de 2000 pb, además de contener 5 exones y 4 intrones, en el cual el tamaño del primer intrón es 10 veces mayor que el resto de los intrones. Interesantemente, ha sido reportado que intrones de mayor tamaño cercanos a la región 5’, están relacionados con la expresión del gen. Para confirmar este antecedente en E. globulus se generaron construcciones moleculares en las cuales el intrón estuviera en distintos contextos moleculares, todas fusionadas con el gen reportero GUS. Estas construcciones fueron utilizadas para transformar de manera estable plantas de A. thaliana. En este trabajo se pudo determinar que el primer intrón de EVP1 funciona como un promotor autónomo, produciendo una expresión tejido específica en polen de A. thaliana. Además, este intrón no participa en la regulación transcripcional del gen EVP1 frente a una condición de salinidad, sequía o ABA.