Examinando por Autor "Jara Concha, Dante Francisco"

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    Rol de la proteína chaperona Hfq en la regulación de la virulencia del patógeno de salmónidos Yersinia Ruckeri
    (Universidad Andrés Bello, 2022) Jara Concha, Dante Francisco; Calderón, Iván; Acuña Olivares, Lilian; Facultad de Ciencias de la Vida
    Yersinia ruckeri es una bacteria Gram negativa, agente causal de la enfermedad entérica de la boca roja en salmónidos, enfermedad asociada a altas tasas de mortalidad, por lo que representa una amenaza latente a la salud de los salmónidos y a la acuicultura, generando pérdidas económicas significativas a países donde la actividad acuícola es relevante, como el caso de Chile. La virulencia bacteriana, tanto de Y. ruckeri como otras bacterias, está asociada a sus diversos procesos fisiológicos y respuestas a estrés, por lo cual es importante conocer los mecanismos moleculares que la regulan, incluyendo aquellos que regulan la resistencia al estrés intra-hospedero y que resultan fundamentales para la proliferación bacteriana en un proceso infectivo. Se reconoce que los RNAs pequeños no codificantes (sRNAs) están involucrados en la regulación de varios procesos fisiológicos y respuestas al estrés en las bacterias, mediante el apareamiento con mRNAs blancos y la subsecuente regulación de su traducción. A su vez, muchos sRNAs requieren de la proteína chaperona Hfq para cumplir sus funciones regulatorias sobre los mRNAs blancos. Es así como esta proteína constituye un factor pleiotrópico en muchas bacterias, al estar involucrada en la regulación de diversos procesos fisiológicos y respuestas al estrés. El objetivo de este estudio fue evaluar el rol de la proteína Hfq en la modulación de respuestas a condiciones de estrés intra-hospedero y virulencia de un aislado ambiental de Y. ruckeri, mediante análisis fenotípicos y moleculares con una cepa carente del gen hfq, tanto en cultivos bacterianos como en ensayos de infección in vitro. Se evaluó la respuesta de una mutante de Y. ruckeri deficiente de Hfq, en comparación con una cepa silvestre, frente a estrés oxidativo y estrés por déficit de hierro, con el propósito de aproximarse in vitro a condiciones prevalecientes en el ambiente intra-hospedero. Se determinó que, bajo las condiciones analizadas, la proteína Hfq no juega un rol crucial en la resistencia frente al estrés por déficit de hierro, pero sí actúa como un modulador de la respuesta al estrés oxidativo evidenciándose un mayor crecimiento en su ausencia. Por otra parte, se realizaron ensayos de infección in vitro en una línea celular de salmón (CHSE-214), demostrando que la ausencia de la chaperona Hfq genera un aumento en la proliferación y capacidad de infección. Finalmente, se analizó la expresión de factores asociados a virulencia y de respuesta a estrés, bajo condiciones de estrés oxidativo y por déficit de hierro, determinando que, en una cepa mutante con deleción del gen hfq, la expresión aumentaba significativamente en la mayoría de los genes estudiados. En su conjunto, los resultados obtenidos en el presente estudio nos permiten evidenciar que la proteína Hfq es requerida para modular respuestas asociadas a estrés y virulencia, reprimiendo la expresión de diversos genes relacionados con estos procesos.