Examinando por Autor "Mora L., Guido"

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    Estudio del efecto de los genes sopd2 u ssej de s. typhimurium en s. typhi en la infección de lineas epiteliales de origen humano
    (Universidad Andrés Bello, 2011) Trombert Leiva, Annette Nicole; Mora L., Guido; Bittner O., Mauricio; Facultad de Ciencias Biológicas; Facultad de Ciencias de la Vida
    Salmonella entérica serovar Typhi y Salmonella entérica serovar Typhimurium corresponden a dos serovares de Salmonella enterica que comparten un 95% de identidad nucleotídica. Sin embargo, mientras 5. Typhi nfecta exclusivamente humanos produciéndoles fiebre tifoidea, S. Typhimurium es un serovar generalista que provoca cuadros de distinta gravedad en diferentes hospederos animales. La especialización que tiene un patógeno hacia un hospedero en particular está dada por la modificación de su acervo genético durante su evolución. Estas modificaciones están dadas por la adquisición de material genético por mecanismos de transferencia horizontal concomitantemente con la pérdida de la función de ciertos genes o inactivación genética (pseudogenes). Esto último, característico de la evolución de parásitos intracelulares como los géneros Rickettsia, Ch/am ydia y Buchnera, se conoce como "Evolución Reductiva" y comienza a generarse cuando la función de ciertos genes se vuelve prescindible. 5. Typhi tiene un 5% de pseudogenes en comparación al 1% que forma parte del genoma del serovar Typhimurium por lo que se estima que se encuentra evolucionando para su adaptación definitiva en el hospedero humano. Sa/mone/la enterica posee dos islas de patogenicidad, las SPl-1 y SPl-2, que contienen y/o regulan genes cuyos productos son imprescindibles para la virulencia de 5. Typhimurium. Los genes sopD2 y ssei codifican para efectores regulados por estas islas los que son translocados hacia la célula eucarionte por medio del sistema de secreción de tipo III. Ambas proteínas forman parte importante en la síntesis y direccionamiento de la vacuola que contiene a Salmone//a (SCV) en células epiteliales y son esenciales en la patogenicidad y virulencia de esta bacteria. Sin embargo, tanto sopD2 como ssei se encuentran anotados como pseudogenes en 5. Typhi, lo que sugiere que la inactivación de estos genes en este serovar podría relacionarse con su proceso de adaptación al hospedero humano. En el presente estudio se analizó cómo la presencia de los genes sseJ y sopD2 de S. Typhimurium afectaban la patogenicidad de S. Typhi cuando se ve enfrentada a líneas epiteliales de origen humano.
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    La hemolisina termoestable directa, tdhA, es parte de un transposón compuesto funcional en Vibrio parahaemolyuticus RIMD 2210633
    (Universidad Andrés Bello, 2010) Mujica Troncoso, Cristóbal Andrés; Mora L., Guido; Facultad de Ciencias Biológicas; Doctorado en Biotecnología
    RESUMEN: Vibrio parahaemolyticus es una bacteria de origen marino y agente causal de un síndrome diarreico por consumo de alimentos marinos contaminados. En Chile, este cuadro se produce cada verano con un número de casos que superan los 1000 afectados. La capacidad de generar la gastroenteritis se relaciona con la presencia de una hemolisina codificada por los genes tdhA y tdhS. Existe una fuerte correlación entre cepas clínicas y los genes tdh, el que además se encuentra presente en V. cholerae, V. mimicus y V. hollisae. La presencia en otras especies se debería a la capacidad de este gen de movilizarse lateralmente lo que se deduce de la existencia de secuencias de inserción (IS) flanqueando el gen tdhA. Durante el desarrollo de este trabajo se ha demostrado que flanqueando al gen tdhA se encuentra una IS 551 pb río abajo, la que también está presente repetida e invertida 2.364 pb río arriba. Al considerar la disposición de ambas IS en función del gen tdhA se observa una estructura similar a la de un transposón compuesto. Se analizó por Southern blot la presencia del transposón, encontrándose en 12 de 20 de las cepas analizadas, tanto clínicas como ambientales. Para evaluar si el transposón era funcional, éste fue clonado en un vector y posteriormente transformado en S. Typhi. Al sobreexpresar la transposasa se generaron mutantes auxótrofas como consecuencia del movimiento del transposón en el cromosoma de la bacteria receptora. Esto nos permite concluir que el gen de virulencia tdhA es parte de un transposón compuesto funcional.