Examinando por Autor "Morales Soto, Marisol"

Mostrando 1 - 1 de 1
  • Miniatura
    Ítem
    Transactivación de IRE1 y PERK por una molécula pequeña inhibidora de quinasa
    (Universidad Andrés Bello, 2013) Morales Soto, Marisol; Bernales, Sebastián; Valenzuela, Pablo
    Las células eucariontes tienen la capacidad de responder a la acumulación de proteínas mal plegadas en el retículo endoplásmico a través de un mecanismo conocido como respuesta a proteínas mal plegadas (UPR). Dos de los tres sensores del UPR; IREl y PERK participan activamente en las decisiones de sobrevida y muerte celular, por lo que constituyen potenciales candidatos para blancos terapéuticos. Ambos sensores son proteínas quinasa y sus regiones luminales son altamente similares e intercambiables, lo que sugiere un mecanismo de activación común. IRE 1 además contiene un dominio endoribonucleasa yuxtapuesto al dominio quinasa. El uso del inhibidor de quinasa APY29, reveló que la ocupación de sitio ATP del dominio quinasa de IREl provoca un cambio conformacional que induce su transactivación y oligomerización, permitiendo así la activación de los dominios endon·ibonucleasa adyacentes. Recientemente se encontró que inhibidores de quinasa pueden actuar como agonistas de la actividad quinasa, al promover la transactivación y oligomerización. Dada la similitud en los mecanismos de activación entre IREl y PERK en esta tesis proponemos estudiar el efecto de análogos de APY29 sobre la actividad quinasa de PERK. Nuestros resultados indican que el análogo AM9 es más potente y selectivo que APY29 en la inducción de la actividad endoribonucleasa de IREl, tanto in vitro como en líneas celulares, y funciona promoviendo su transactivación y oligomerización. Este análogo además es capaz de unirse e inhibir la actividad quinasa de PERK in vitro. Sin embargo y de manera interesante, análisis en líneas celulares muestran que AM9 puede actuar, dependiendo de la concentración, como agonista y como un inhibidor de la actividad quinasa de PERK, mostrando una curva de activación tipo campana. Esto sugiere que PERK se activa por un mecanismo dependiente de transactivación y oligomerización. Nuestros resultados muestran que un mismo inhibidor de quinasa puede modular a dos de los tres sensores del UPR. Por otra parte, estos resultados demuestran que PERK es activable por inhibidores de quinasa, lo cual es importante de considerar durante el uso y diseño de drogas que apunten a este sensor del UPR.