Examinando por Autor "Osses Rojas, Christian Maximiliano"

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    Aislamiento y caracterización de virus que infectan a distintos cocolitofóridos
    (Universidad Andrés Bello, 2024) Osses Rojas, Christian Maximiliano; Eissler, Yoanna; Ugalde, Juan; Facultad de Ciencias de la Vida; Escuela de Biociencias
    Los virus son el grupo de agentes biológicos de mayor abundancia dentro de los ambientes marinos, no obstante las investigaciones asociadas al impacto ecológico de los virus aún son recientes. En este contexto se ha demostrado que tanto virus temperados como virus líticos influyen en la dinámica de los florecimientos algales, lo que posteriormente induce distintos cambios de gran magnitud dentro del ecosistema marino y el medio ambiente. Microalgas como el cocolitofórido, Emiliania huxleyi, son un componente principal y activo del ciclo del carbono, actuando a través de procesos como la bomba biológica, además tienen un importante rol dentro del ciclo del azufre. En éste, a través de enzimas específicas como la DMSP-liasa liberan dimetil sulfuro hacía la atmósfera, donde posteriormente a partir procesos oxidativos ambientale,s éste se transforma en distintos aerosoles, que ulteriormente actúan como en núcleos en el proceso de la condensación de nubes. Por lo tanto, esta investigación tuvo como objetivo principal aislar y caracterizar un nuevo patógeno infectivo de al menos una especie de cocolitofóridos. Siguiendo un protocolo estandarizado de incubación de cultivos celulares, se probaron distintas muestras de agua de mar provenientes de distintas masas de agua nacionales, esperando producir una disminución de la abundancia celular por debajo del 50% en relación a controles no tratados. Se logró el objetivo y se obtuvo lisis positiva para infección en al menos 3 cepas de cocolitofóridos. Sin embargo, ante la incapacidad de generar una reinfección con las muestras de los lisados obtenidos, se decidió caracterizar un agente lítico previamente aislado por el Laboratorio de Virología de la Universidad de Valparaíso, desde el Fiordo Comau. Este virus fue denominado EhV-H1 1 y 2.1, ya que se obtuvieron dos clones del virus al momento de purificar el patógeno. Los resultados obtenidos al caracterizar el ciclo lítico, rango de infección, características genéticas y morfológicas de este posible patógeno fueron comparadas con EhV-163, un Coccolithovirus previamente detallado que fue aislado en el fiordo Raunefjorden, Noruega. Luego de analizar los clones virales a través de técnicas, como microscopía de epifluorescencia, electrónica de transmisión y PCR en tiempo real, fue posible confirmar con una alta precisión que el virus EhV-H1 corresponde a un Coccolithovirus. Este virus causó lisis en 6 cepas de E. huxleyi y una cepa de Gephyrocapsa muellerae aisladas en las costas de Chile, y en 3 cepas de E. huxleyi aisladas en zonas geográficas como el Atlántico Norte, en la zona oceánica cercana a Nueva Zelanda y el Pacifico Sur, zona ecuatorial. Finalmente, se comparó el rango y la cinética de infección de este nuevo Coccolithovirus de origen local, con el virus EhV-163, de modo que fue posible determinar que EhV-H1 presenta una mayor efectividad infectiva, genera mayor mortalidad y más rápido en las cepas de origen nacional.