Examinando por Autor "Pino Ajenjo, Constanza"

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    La proteína PTB1 es un factor trans-activador del ires del virus del tumor mamario murino
    (Universidad Andrés Bello, 2011) Pino Ajenjo, Constanza; López-Lastra, Marcelo
    El mensajero completo del virus del tumor mamario murino (MMTV), que codifica para las proteínas estructurales Gag y Gag-Poi, posee una estructura 5' cap, un sitio interno de entrada a ribosomas (IRES) en su región 5' no traducida (UTR), marco de lectura abierto (ORF, siglas en inglés de open reading frame) y una cola 3' poli(A). Se ha sugerido que la actividad IRES del mRNA completo de MMTV requiere de factores celulares que aún no han sido identificados. En este estudio se evaluó el efecto de la proteína antígeno R humana (HuR), la proteína Staufen 1 (Staul), la proteína rio arriba de N-ras (Unr) y la proteína de unión al tracto de polipirimidina 1 (PTBl) sobre lii actividad IRES ex vivo de MMTV. Utilizando ensayos de co-transfección en células HEK 293T de plasmidos que expresan las proteínas HuR, Staul, Unr o PTBI junto a un plasmido que codifica para un mRNA bicistrónico que contiene el elemento IRES de MMTV, se estableció que las proteínas HuR, Stau 1 y Unr no afectan la síntesis de proteína mediada por el IRES de MMTV mientras que la proteína PTB 1 es capaz de estimular el inicio de la traducción capindependiente de MMTV. La estimulación de la traducción mediante IRES de MMTV por parte de la proteína PTB 1 se observó tanto en células HEK 293T como en células HeLa. Como controles adicionales se utilizó vectores bicistrónicos con los elementos IRES de HCV o HIV -l. Losresultados muestran que Stau1 estimula la iniciación interna de ambos IRES, en cambio Unr es capaz de estimular solo el IRES de HCV. Esto sugiere que ambas proteínas cumplen su función de trans-activadores de IRES (IT AF). Posteriormente, la búsqueda de sitios de unión putativos de la proteína PTB1 en el 5' UTR del mensajero completo de MMTV, región que posee actividad IRES de MMTV, sugiere la existencia de sitios de interacción para PTBI. Estas observaciones sugieren que PTB 1 estimula el inicio de la traducción IRES de MMTV al interactuar con el 5' UTR de MMTV. En conjunto, este trabajo de tesis permite establecer que la proteína PTB1 es un ITAF del IRES de MMTV.