Examinando por Autor "Reyes, Ariel"
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Ítem Aislamiento, caracterización y expresión del factor de crecimiento tipo insulina I (igf-1) y el receptor de la hormona del crecimiento (ghr) del lenguado chileno (Paralichthys adspersus) : efecto de la restricción nutricional y el crecimiento compensatorio(Universidad Andrés Bello, 2007) Fuentes Jofré, Eduardo Nicolás; Molina Sirguiado, Alfredo Iván; Figueroa, Jaime; Reyes, Ariel; Facultad de Ecología y Recursos Naturales; Escuela de Ciencias del MarSe aisló y caracterizó el cDNA de igf-I y ghr de lenguado chileno (Paralichthys adspersus). Ambos genes muestran características comunes presentes en sus parálogos de otras especies de peces. Asimísmo se evaluó su expresión y la del inhibidor del crecimiento muscular miostatina en distintos tejidos, encontrándose expresión en todos los tejidos estudiados. Adicionalmente, se estudió el patrón de expresión de igf-I y ghr en estadios larvales, observándose una expresión dinámica en ambos genes. Se evaluó la influencia de la restricción nutricional y realimentación sobre la expresión de los mRNAs de igf-I y ghr por PCR en tiempo real. Los niveles del mRNA de ghr en el músculo se incrementaron durante el periodo de hambruna, mientras que durante la realimentación decrecieron. Un patrón de expresión opuesto fue encontrado para igf-I. En base a los resultados obtenidos se concluye que la expresión de genes involucrados en crecimiento puede ser utilizada como herramienta para evaluar el estado nutricional de peces de importancia comercialÍtem Descripción de resultados obtenidos de "caracterización de TWIST-1 asociado a la migración de las células de la cresta neural"(Universidad Andrés Bello, 2019) Piña Carreño, Natalia Josefina; Reyes, Ariel; Facultad de Ciencias de la VidaLa cresta neural es un tejido transitorio que se ubica entre el ectodermo neural y no neural, está formado por células que tienen la capacidad de migrar grandes distancias en el embrión, utilizando mecanismos similares a los descritos en cáncer donde la migración tiene características negativas. En cáncer se ha descrito que la migración celular (metástasis) depende de la activación de represores transcripcionales que pertenecen a la familia Twist y Snail. En Xenopus leavis el factor de transcripción Twist-1, un represor transcripcional, se encuentra regulado transcripcionalmente por Hif-1. Esto es evidenciado cuando, al perder Hif-1 su función, se produce una reducción en migración de las células de la cresta neural, lo que se visualiza en la incorrecta formación de los tejidos derivados. En pez cebra se desconoce si Twist-1 es necesario para la correcta migración de las crestas neurales, además de que esta especie posee ortólogos para el gen Twist-1 (Twist-1a y Twist-1b) pero se ha descrito que depende de un factor de transcripcional distinto denominado Snail. En función de estos antecedentes nos preguntamos si, ¿El factor de transcripción Twist-1b es necesario para el correcto desarrollo de las células de la cresta neural en pez cebra? Para contestar esta pregunta; primero se determinó el patrón de expresión de los transcritos twist-1a y twist-1b y luego se analizó el efecto de la falta de función de Twist-1a y Twist-1b en tejidos derivados de la cresta neural como también en la cresta neural. Nuestros resultados sugieren que Twist-1 se expresará en estadios premigratorios y migratorios; y que la pérdida de función de Twist-1 afectará y se verá en el correcto desarrollo de tejidos derivados de la cresta neural.Ítem Estabilización de Hif-1α en la cresta neural de pez cebra(Universidad Andrés Bello, 2019) Espina Hidalgo, Jaime; Reyes, ArielEl factor inducido por hipoxia-1 (HIF-1) es considerado el regulador maestro de la respuesta celular a hipoxia (baja tensión de oxígeno). HIF-1 presenta un tipo de respuesta rápida en la cual, bajo tensiones normales de oxígeno (normoxia) el factor es degradado vía proteosoma, mientras que en condiciones de hipoxia el factor se estabiliza, permitiendo la activación de genes necesarios para el transporte de oxígeno, cambios en el metabolismo y angiogénesis. El oxígeno es capaz de difundir a través de las células, sin embargo, se ha descrito en modelos de cáncer que en tumores de tamaños mayores a 1 mmel oxígeno es incapaz de difundir eficientemente hacia el interior de éste, provocando un centro hipóxico capaz de estabilizar HIF-1. No obstante, existe una creciente evidencia que indica que HIF-1 también podría estar siendo estabilizado durante normoxia por mecanismos independientes de oxígeno. Ambos mecanismos de estabilización de HIF-1, tanto por hipoxia como en normoxia, han sido estudiados extensamente en líneas celulares mientras que in vivo actualmente existe muy poca evidencia sobre la naturaleza de la estabilización de HIF-1.En modelos de cáncer se ha descrito que la estabilización de HIF-1 lleva a un estado celular llamado efecto Warburg, el cual se caracteriza por un cambio de metabolismo energético de oxidativo a glicolítico fermentativo aun cuando los niveles de oxígenos son normales, estado conocido como glicólisis aeróbica. Estudios in vivo en ratón han mostrado que animales knockout para los genes Hif-1αmueren durante el desarrollo embrionario entre los días 8-11 de gestación (E8-E11), exhibiendo dramáticos defectos cardiovasculares, en la angiogénesis y en el cierre del tubo neural. En nuestro laboratorio se ha reportado otra función de Hif-1α en el desarrollo embrionario, mostrando su importante rol en la migración de las células de la cresta neural (NCCs). En el desarrollo de las células de la cresta neural podemos reconocer dos procesos: 1) la inducción de estas célulasy 2) la migración delas mismas a través del embrión. En nuestro laboratorio se ha descrito que Hif-1α(de Xenopus laevisy Danio rerio) regulados aspectos de la migración de lasNCCs:i)EMT: transición epitelial-mesemquimática, es decir la transformación de las NCCs en un mesénquima móvil desde de un epitelio y ii)Quimotaxis, o migración direccionada de las NCCs a lo largo del embrión. Entonces, el ¿cómo ocurre la estabilización de Hif-1αin vivo en las células de la cresta neural?, aún no ha sido determinado usando un modelo animal. Las NCCs tanto en pez cebra como en Xenopus laevis, se localizan cerca de la superficie del embrión, bajo una única capa de células de la epidermis, esta sola observación sugiere que el oxígeno sería capaz de difundir hasta este territorio y que los mecanismos de estabilización de Hif-1α debieran ser independientes de este gas. Con estos antecedentes nos preguntamos:¿cuáles son los mecanismos que regulan la estabilización Hif-1 durante la migración de la cresta neural? Hipotetizamos que la estabilización de Hif-1 en las células de la cresta neural de pez cebra se debe a dos mecanismos independientes de oxígeno: 1)señales extracelulares, como factores de crecimiento que permitirían la EMT, y 2) el contexto metabólico energético intracelular en estas células, similar a lo descrito para el efecto Warburg, que mantendría a Hif-1estabilizado durante la migración de las NCCs. En esta tesis logramos demostrar que la cresta neural de pez cebra es un tejido expuesto a concentraciones normales de oxígeno. Además, que la falta de función del factor de crecimiento derivado de plaquetas-1aa(Pdgf1aa),afecta tanto la migración de la cresta neural como la activación de genes blancos de Hif-1durante el desarrollo de este tejido, lo que siguiere que la vía Pdgf, en pez cebra, participa de la estabilización de Hif-1independiente de oxígeno. Por otra parte, nuestros datos indican que las NCCs migratoria presentan expresión aumentada de transcritos de genes glicolíticos, comparado con la expresión de transcritos de genes del ciclo de ácidos tricarboxílicos (TCA), y que poblaciones celulares dentro de mismo tejido presentan una mayor captación de glucosa, sugiriendo que las NCCs podrían presentar metabolismo de glicólisis aeróbica. Con estos datos proponemos que el cambio metabólico hacia la glicólisis aeróbica(estado similar al efecto Warburg), promueve la disminución de metabolitos del TCA, que resultaría en la estabilización de Hif-1y en la correcta migración de las NCCs. En este contexto, observamos que embriones expuestos al aumento de2-oxoglutarato, un intermediario del TCA, mostraron defectos en la migración de la NCCs; fenotipos que fueron rescatados con un mutante de Hif-1insensible a degradación. Estos datos apoyan que es necesaria la reducción de2-oxoglutarato(TCA), para la correcta migración de las NCCs,sugiriendo una función del metabolismo energético durante el desarrollo de este tejido.Ítem Estudio de la función de Hif-1α en la formación de la línea lateral posterior del pez cebra(Universidad Andrés Bello, 2012) Barros Suárez, Miriam Roxana; Reyes, Ariel; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de BioquímicaHIF-1 es el gen maestro en respuesta a la baja tensión de oxígeno. HIF-1 es un heterodímero α/β. Ambas subunidades se expresan y traducen constitutivamente en el citosol, sin embargo HIF-1α presenta regulación post-traduccional al contener en su estructura un dominio de degradación dependiente de oxígeno (ODDD). Un gen blanco de HIF-1, que participa en el desarrollo del sistema nervioso, es el receptor de quimioquina CXCR4. En el pez cebra, Cxcr4 participa en la migración del primordio de la línea lateral posterior, sistema mecanosensorial presente en peces y anfibios. En esta tesis nos propusimos estudiar la función de Hif-1α en el desarrollo de la línea lateral del pez cebra. Para ello se realizaron estudios funcionales. Mediante experimentos de inyección de morfolinos en embriones de pez cebra, se estudió la pérdida de función de Hif-1α. La ganancia de función de Hif-1α se estudió por inyección de un mRNA de Hif-1α que carece el ODDD Los fenotipos se analizaron por hibridación in situ, inmuhistoquímica y en líneas transgénicas de pez cebra que expresan GFP en las células del primordio (claudinB) y células del manto del neuromasto (ET20). Los resultados de la pérdida de función de HIF-1α mostraron una disminución en la expresión de cxcr4b, pero no de cxcr7b, ambos genes están relacionados con la migración del primordio, sin embargo, no se detectaron problemas en la migración del primordio por la línea transgénica claudinB:GFP. Además, se observaron defectos en el número de neuromastos depositados y en la funcionalidad de las célula ciliadas por la pérdida de la incorporación de la tinción vital DiAps en larvas transgénicas ET20. Además, se observó una disminución en la proliferación de las células del primordio por inmunofluorescencia contra BrdU e Histona h3-fosforilada. Interesantemente, en este contexto los resultados de la hibridación in situ para lef1 mostraron una disminución en la expresión de este efector de la Wnt/ -catenina sugiriendo un rol de este gen en los efectos observados asociados con la proliferación del primordio. Por otro lado, la ganancia de la función de Hif-1α indujo un aumento en cxcr4b y un aumento en la proliferación de las células primordio. Este trabajo proporciona evidencia de la importancia de Hif-1α para el correcto desarrollo de la línea lateral posterior del pez cebra.Ítem Estudio de la función de la variante de histona macroH2A2 en el desarrollo de la retina del pez cebra(Universidad Andrés Bello, 2012) Guajardo Cáceres, Laura Inés; Reyes, Ariel; Facultad de Ciencias Biológicasa variante de histona macroH2A regula la expresión génica principalmente por represión de la transcripción, asociándose a eventos de heterocromatinización, como la inactivación del cromosoma X. Estudios in vitro indican que macroH2A podría regular el desarrollo embrionario, permitiendo la expresión de genes Hox y de las familias génicas Dix, Pax y Six que regulan el desarrollo temprano del sistema nervioso, ojo y retina. Además, sólo el transcrito de la isoforma macroH2A2 se expresa durante el desarrollo embrionario del pez cebra. En este contexto el objetivo principal de este trabajo fue la caracterización de la función de macroH2A2 durante la formación de la retina del pez cebra. La determinación del patrón de expresión del transcrito macroH2A de pez cebra por hibridación in situ, muestra que sólo la isoforma macroH2A2 se expresa en el cerebro y retina durante el desarrollo embrionario, principalmente en la región anterior del embrión, en el primordio, vesícula y copa ópticas, el neuroepitelio retinal y en las capas de células ganglionares y plexiforme interna de la retina diferenciada. Esta expresión concuerda con las etapas de proliferación, especificación y diferenciación de distintos territorios en el sistema nervioso central, especialmente con el desarrollo de la retina. Con estos antecedentes se decidió caracterizar el efecto de la falta de función (knockdown) de macroH2A2 durante el desarrollo de la retina usando la inyección de morfolinos específicos. El knockdown específico de macroH2A2 afectó principalmente la región anterior del embrión, coincidente con los territorios de expresión del transcrito de macroH2A2. Se obtuvieron dos fenotipos reproducibles y dependientes de la concentración de morfolino inyectado: embriones acéfalos (fenotipo severo) y con microcefalia, microftalmia y ausencia de las capas retinales (fenotipo leve). Este último consecuencia de una retinogenesis defectuosa. La caracterización del fenotipo leve, durante el desarrollo de la retina muestra que la etapa proliferativa de los progenitores retinales, que darán origen a todos los tipos celulares de la retina, se llevó a cabo normalmente. Sin embargo, la etapa de determinación ocurrió en forma defectuosa. Se observaron defectos en la inhibición de la proliferación, necesaria para la salida del ciclo celular de los progenitores retinales y posterior diferenciación. En la retina de las larvas morfantes se mantuvieron elevados los niveles de ciclinaD1, PCNA y p-Histona H3, con un evidente alargamiento de la fase S del ciclo celular. Por otro lado, también se detectaron niveles aumentados de [3- catenina en las retinas morfantes de macroH2A2, siendo posiblemente ésta una de las causas de la proliferación aumentada observada en tejido de la retina. Estos antecedentes sugieren fuertemente que macroH2A2 contribuiría a la regulación de la inhibición de la vía de señalización Wnt/[3-catenina en la retina en desarrollo y que además sería necesaria para la progresión y salida del ciclo celular de los progenitores retinales. Este trabajo de tesis es el primer estudio in vivo que describe la función de la variante de histona macroH2A2 en un proceso específico del desarrollo embrionario, la retinogenesis. Estos datos contribuyen a aumentar nuestro conocimiento, aún escaso, sobre la participación de mecanismos epigenético en el desarrollo embrionario.Ítem Estudio del efecto de la hipoxia sobre la expresión de factores miogénicos en pez cebra (Danio rerio)(Universidad Andrés Bello, 2009) Ríos Morris, Eduardo Andrés.; Molina Sirguiado, Alfredo Iván; Reyes, Ariel; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de BioquímicaLa mayoría de los organismos poseen un metabolismo dependiente de oxígeno. Cuando la concentración de oxígeno disminuye (hipoxia), es afectada la homeostasis celular, lo que promueve la activación de diferentes mecanismos moleculares que ayudan a compensar este estrés. Estos mecanismos de adaptación están principalmente regulados por un factor de transcripción llamado HIF-1 (hypoxia inducible factor-1), el que induce la expresión de genes relacionados con la homeostasis del oxígeno como vegf (vascular endotelial growth factor), epo (eritrophoyetin), glutl (glucose transporter 1) y aldo (aldolase), de manera de asegurar la sobrevida celular. A su vez, se ha registrado en ratas adultas que durante eventos de hipoxia existe un aumento de la expresión de la hormona de crecimiento (GH) y se encuentra ampliamente descrito que en estos casos GH tendría un rol en la sobrevida de las células frente a la falta de oxígeno. Durante el desarrollo embrionario no se ha definido función para gh, solamente se ha relacionado con la formación de la glándula hipofisiaria a partir de las 42 horas post fertilización (hpf). En esta tesis se describe la expresión de gh y sus receptores (ghrs) durante el desarrollo embrionario de pez cebra. Se observó que la expresión de la gh, id-i, y sus respectivos receptores, aumenta bajo tratamientos de hipoxia. Probablemente la sobre-expresión de la gh y miembros de su vía de señalización es regulada por HIF-1. Además, se discutió el probable papel de la sobre-expresión de factores de crecimiento durante la miogénesis en función de la relación que existe entre la vía de señalización somatotrofa y el desarrollo del tejido múscular. Los resultados sugieren que la expresión de los genes de la vía somatotrofa estarían cumpliendo un papel citoprotector durante el desarrollo embrionario, ayudando a tolerar el estrés hipóxico para asegurar la sobrevida del embrión y que además estos factores estarían ejerciendo efectos positivos sobre el desarrollo del músculo.Ítem Evaluación del efecto del estrés por manejo en la expresión de genes asociados a la inmunidad del congrio colorado (Genypterus Chilensis) mediante RNA-seq(Universidad Andrés Bello, 2017) Aballai Valdés, Víctor Manuel; Valdés, Juan Antonio; Reyes, Ariel; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Ingeniería en BiotecnologíaEl congrio colorado (Genypterus chilensis) es una especie endémica propuesta para la diversificación del mercado acuícola chileno. El Centro de Investigación Marina de Quintay (CIMARQ) muestra los primeros avances en relación al cultivo intensivo de este ejemplar. Desafortunadamente, uno de los principales problemas asociados al cultivo intensivo de peces es el estrés generado durante el desarrollo de esta actividad, siendo el estrés por manejo uno de los más comunes. Se ha reportado que el estrés afecta de diferentes formas la inmunidad de los teleósteos, lo que pone en riesgo la supervivencia de estos animales durante su cultivo. Hoy en día aún existen diversas interrogantes respecto a cómo el estrés puede afectar la inmunidad de los peces, y más aún en congrio colorado. Además, la información biológica relacionada con este teleósteo es escasa y pesar de que el primer transcriptoma de referencia secuenciado a partir de muestras de tejido muscular y hepático fue recientemente anotado, éste no entregó datos relevantes respecto a la expresión de genes asociados a respuesta inmune durante la respuesta a estrés. De esta manera, el objetivo de este trabajo es analizar la expresión diferencial de genes asociados a la regulación del sistema inmune del congrio colorado en respuesta al estrés por manejo. Para esto se ensambló de novo el transcriptoma de riñón anterior de congrio colorado, principal órgano inmunitario en peces. Este está conformado por 86.840 secuencias, de las cuales el 42% tiene anotación funcional. El estudio de expresión in silico (RNA-seq) permitió identificar 1.094 genes expresados diferencialmente. Se validó la expresión de algunos de éstos genes mediante RT-qPCR. El análisis de enriquecimiento ontológico reveló que procesos biológicos como la respuesta a glucocorticoides, sistema circulatorio y sistema inmune se veían enriquecidos en la condición de estrés, mientras que procesos relacionados con el metabolismo, especialmente el catabolismo y la biosíntesis de distintas moléculas como nucleótidos y aminoácidos, entre otras, se encontraron reprimidos. Los hallazgos recopilados en el presente trabajo enriquecen los conocimientos relacionados con el efecto que genera el estrés por manejo, una condición inherente de los cultivos, en la fisiología de este organismo, particularmente en su respuesta inmune. Ésta nueva información se podría utilizar en futuros planes de manejo para finalmente concretar un plan de cultivo de congrio colorado con proyecciones a largo plazo.Ítem Evaluación del efecto fenotípico y celular provocado por la infección de flavobacterium psychrophilum en el pez cebra(Universidad Andrés Bello, 2017) Soto Comte, Daniela; Reyes, Ariel; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Ingeniería en BiotecnologíaEn la última década, la acuicultura ha tenido un importante crecimiento siendo la competencia directa de la pesca extractiva. Se estima que para el año 2030 la acuicultura aportará el 62% de la producción destinada al consumo humano. En los últimos años, se ha intensificado el estudio de enfermedades y patógenos de importancia comercial con el objetivo de controlar o erradicar estas patologías de los cultivos. Dentro de las especies más cultivadas, están la trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) y el Salmón coho (Oncorhynchus kisutch). Estas especies se ven afectadas por diversas enfermedades dentro de las cuales encontramos la enfermedad del agua fría (EAF). Esta enfermedad, se caracteriza por generar lesiones y úlceras en la piel de los peces en cultivo, las cuales en su estado severo exponen órganos internos provocando la muerte del individuo infectado. El agente responsable de EAF es la bacteria Flavobacterium psychrophilum (F. psychrophilum). Actualmente, se conoce sólo parte del mecanismo de infección, por lo que parece importante generar más estudios para definir el proceso y progresión de la infección, disminuyendo la infección en peces. Un buen modelo de estudio es el pez cebra, es de tamaño pequeño y presenta un rápido crecimiento. Es versátil en cuanto a las herramientas celulares y moleculares que se encuentran disponibles. Ha sido utilizado como modelo de infección en otras enfermedades importantes para la acuicultura. En este estudio se utilizo al pez cebra como modelo de infección para F. psychrophilum para evaluar el efecto a nivel fenotípico y celular. Como resultado, obtuvimos un fenotipo similar a lo descrito para EAF en otras especies, junto con una activación del sistema inmune innato frente a la presencia de la bacteria. Por tanto, el pez cebra es un buen modelo de infección para F. psychrophilum, el cual podría ser de gran importancia, para establecer formas de control y erradicación de este organismo infeccioso.Ítem Rol del factor de transcripción inducible por hipoxia 1(Hif-1) en la transición epitelial-mesenquimática durante el desarrollo de la cresta neural de pez cebra(Universidad Andrés Bello, 2019) Marchant Soto, Cristian Leonardo; Reyes, ArielLa migración celular es un proceso biológico altamente regulado durante el desarrollo y vida de un organismo. Esta conducta migratoria, se lleva a cabo gracias al proceso de la transición epitelial-mesenquimática(EMT),que se caracteriza por un recambio en las moléculas de adhesión, regulado por genes de la familia SNAIL y TWIST, los cuales a su vez reprimen transcripcionalmente el genCDH1 (E-cadherina). Las células de la cresta neural son un tejido pluripotente que realiza eventos de EMT. En ese sentido, datos de nuestro laboratorio mostraron evidencias que el factor inducido por hipoxia (Hif-1), es necesario para la correcta migración de la cresta neural (NCCs) neural en Xenopus laevis. Recientemente, también hemos reportado que la NCCs de pez cebra es un tejido no hipóxico, y que la estabilización de Hif-1α en este tejido, dependería entre otros, del factor de crecimiento Pdgf1a.En ese contexto, las vías moleculares que comandan la EMT durante el desarrollo de las NCCs en pez cebra aún no se han determinado. Para lo cual nos hemos preguntado ¿cuál(es) son los represores transcripcionales que regulan la EMT durante el desarrollo de la cresta neural? y ¿cuál(es) de ellos son regulados por Hif-1?Para contestar esta pregunta hipotetizamos que: durante la transición epitelial-mesenquimática de las células de la cresta neural del pez cebra, Hif-1 activa la expresión de los factores de transcripción Twist1 y Snail1b,represores transcripcionales, que a su vez reprimen la expresión de E-cadherina. En esta tesis encontramos que los represores de la expresión de E-cadherina,Twist1 y Snail1b,son regulados transcripcionalmente porHif-1, aumentando su expresión con la estabilización de Hif-1durante la migración de las células de la cresta neural del pez cebra. Además, describimos por primera vez que los dos represores transcripcionales, Twist1 y Snail1b, son necesarios para reprimirla expresión de E-c adherida durante la transición epitelial-mesenquimática de las células de la cresta neural. También, demostramos la función in vivo de uno de los represores transcripcionales efectores de la EMT (Twist1) y su rol en la migración de as células de la cresta neural. Por otra parte, identificamos segmentos de ADN cercanos al sitio +1 de inicio de la transcripción, como regiones promotoras que son activadas transcripcionalmente por Hif-1, en genes necesarios para que ocurra correctamente la transición epitelial-mesenquimática:twist1, snail1by cxcr4a.Asimismo, describimos regiones reguladoras en un marcador delaEMT:cdh1En conjunto estos hallazgos, describen la función de genes claves que regulan el programa transcripcional de la transición epitelial-mesenquimática, que son activados por Hif-1 en la cresta neural de pez cebra.Ítem Sublethal concentrations of waterborne copper induce cellular stress and cell death in zebrafish embryos and larvae(Sociedad de Biología de Chile, 2011) Hernandez, Pedro; Undurraga, Cristian; Gallardo, Viviana; Mackenzie, Natalia; Allende, Miguel; Reyes, ArielCopper is an essential ion that forms part of the active sites of many proteins. At the same time, an excess of this metal produces free radicals that are toxic for cells and organisms. Fish have been used extensively to study the effects of metals, including copper, present in food or the environment. It has been shown that different metals induce different adaptive responses in adult fish. However, until now, scant information has been available about the responses that are induced by waterborne copper during early life stages of fish. Here, acute toxicity tests and LC50 curves have been generated for zebrafish larvae exposed to dissolved copper sulphate at different concentrations and for different treatment times. We determined that the larvae incorporate and accumulate copper present in the medium in a concentration-dependent manner, resulting in changes in gene expression. Using a transgenic fish line that expresses enhanced green fluorescent protein (EGFP) under the hsp70 promoter, we monitored tissue-specific stress responses to waterborne copper by following expression of the reporter. Furthermore, TUNEL assays revealed which tissues are more susceptible to cell death after exposure to copper. Our results establish a framework for the analysis of whole-organism management of excess external copper in developing aquatic animals.