Examinando por Autor "Troncoso Cotal, Rodrigo"

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    Papel del receptor de glucocorticoide isoforma β en el metabolismo de glucosa en la línea celular HepG2
    (Universidad Andrés Bello, 2018) Sepúlveda Quiñenao, Claudia; Troncoso Cotal, Rodrigo; Facultad de Ciencias Biológicas; Escuela de Ingeniería en Biotecnología
    Los glucocorticoides (GCs) son hormonas esteroideas que regulan diversos procesos celulares, como el metabolismo de carbohidratos, proteínas y ácidos grasos. En el metabolismo de los carbohidratos, los GCs promueven la gluconeogénesis, la síntesis de glicógeno y tiene una acción antagonista a la insulina. Para modular estas acciones, es necesario que los GCs actúen a través del receptor de GC (GR). Mediante un splicing alternativo en mRNA del GR se generan dos isoformas: GRα, que es el clásico receptor de GC, y GRβ que actúa como dominante negativo de GRα. Además, GRβ se encuentra relacionado a la resistencia a GC en pacientes con asma, artritis reumatoides y leucemia. Junto a estos antecedentes, en diversos modelos celulares se relaciona GRβ con la migración y proliferación celular, la inhibición de la gluconeogénesis y la activación de la vía Akt. Por otro lado, la insulina dirige el consumo, conversión y almacenamiento de glucosa, lo cual inhibe la degradación de glicógeno y gluconeogénesis. Estas acciones de insulina están mediadas por la activación de la vía de señalización PI3K-Akt. Recientemente, se ha reportado que esta hormona y la alimentación pueden aumentar la expresión del GRDebido a estos antecedentes se establece la siguiente hipótesis “la isoforma GRβ aumenta los efectos de la insulina en el metabolismo de la glucosa en células HepG2”. Para determinar la participación de GRβ en la regulación del metabolismo de la glucosa inducido por insulina, se utilizó la línea celular HepG2 a la cual se le sobreexpresó GRβ y se estimuló con insulina y dexametasona. Se determinó los niveles del mRNA de PDK4, G6Pasa, GLUT1-2-4, HK2, GBE, PCK1-2 y PTEN por PCR en tiempo real. Mediante western blot se determinó p-Akt, p-P70S6K, p-AMPK y glicógeno sintasa. Los niveles de ATP se determinaron por Luminometría. La captación de glucosa y la acumulación de glicógeno por microscopía de fluorescencia. El análisis estadístico fue ANOVA de una vía y el post- análisis Test de Tuckey. Nuestros resultados indican que GRβ participa en el metabolismo de la glucosa ejerciendo efectos similares a insulina; disminuyendo mRNA de G6Pasa y PCK2 y aumentando junto a insulina mRNA de GLUT2, GLUT4, PDK4 y GBE. Además, activa la vía Akt, promoviendo la captación celular, formación de glicógeno y la proliferación celular de forma independiente a insulina.