Análisis de la expresión de los genes codificantes para las moléculas MIP3α y SLPI en células epiteliales de trompa de Falopio humana infectadas con Neisseria gonorrhoeae

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dc.contributor.advisorRodas Garrido, Paula
dc.contributor.authorArgandoña Cordero, Michel
dc.contributor.authorSalas Cordero, Gabriela
dc.contributor.authorSepúlveda Silva, Nicolás
dc.contributor.editorFacultad de Medicina
dc.contributor.editorEscuela de Tecnología Médica
dc.date.accessioned2019-02-05T18:44:51Z
dc.date.available2019-02-05T18:44:51Z
dc.date.issued2017
dc.descriptionTesis (Tecnólogo Médico)es_ES
dc.description.abstractLa gonorrea es una infección de transmisión sexual (ITS) causada por el agente patógeno Neisseria gonorrhoeae, que corresponde a un microorganismo bacteriano con morfología cocoide estructuralmente caracterizado por su disposición en diplococo y con afinidad tintorial Gram-negativo. Se considera un patógeno humano exclusivo y dentro de sus factores de virulencia destaca la presencia de Pili, que le proporciona alta capacidad de fijación a mucosas. La presentación clínica de esta ITS en mujeres es principalmente asintomática, pero puede llegar a generar graves secuelas cuando logra ascender hacia la mucosa epitelial de las trompas de Falopio, ya que puede desencadenar enfermedad inflamatoria pélvica, embarazo ectópico e incluso producir infertilidad. Si bien en la infección con gonococo se ha estudiado ampliamente la secreción de algunas citoquinas proinflamatorias por parte de tejido infectado con reclutamiento masivo de macrófagos y neutrófilos a la zona de infección, se desconoce si hay participación de factores moleculares involucrados en el reclutamiento de células de la inmunidad innata, tales como la molécula secretora de leucocitos inhibidores de proteasas (SLPI), cuya función es proteger a la mucosa de la enzima elastasa liberada desde los gránulos primarios o azurófilos de los neutrófilos y la proteína inflamatoria de macrófagos (MIP3α), con función en el reclutamiento de linfocitos y neutrófilos. Por lo tanto, el objetivo de esta unidad de investigación fue evaluar los niveles de expresión de los genes codificantes para estas tres moléculas. La metodología para evaluar la expresión de estos genes fue mediante el análisis de transcripción reversa y PCR cuantitativo (RT-qPCR) desde RNAm total de células epiteliales de trompas de Falopio humanas infectadas con Neisseria gonorrhoeae a distintos tiempos (4, 8, y 24 horas). El control de la expresión de genes se realizó mediante la detección de la expresión del gen ribosomal 18S, y como control de la infección se utilizó la medición de la expresión de los mismos genes en células que no han sido infectadas. Nuestros resultados mostraron que para el gen MIP3α a las concentraciones de RNA total empleadas en este estudio no es posible obtener resultados que demuestren que exista un aumento en la concentración de este ante la infección por Neisseria gonorrhoeae, mientras que para el gen SLPI si bien se logran obtener resultados que demuestran un aumento en la expresión del gen en estado de infección, no se puede asegurar que este pertenezca SLPI ya que se detectó la presencia de lo que podría ser posible contaminación o dímeros de primers. Se concluye que para MIP3α es necesario aumentar la concentración de RNA total utilizadas por sobre 4000 pg y sobre los 40 ciclos de PCR esto en base al ensayo realizado en este estudio, con el fin de poder responder si existe un aumento de MIP3α durante la infección por gonococo. Para el gen SLPI si bien existe un aumento de concentración se deben tomar todas las precauciones necesarias para evitar contaminaciones las cuales interfieren y de esta forma poder comprobar si el aumento de concentración se debe efectivamente a el gen SLPI.es_ES
dc.identifier.urihttp://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/7989
dc.language.isoeses_ES
dc.publisherUniversidad Andrés Belloes_ES
dc.subjectNeisseria Gonorrhoeaees_ES
dc.subjectTrompas de Falopioes_ES
dc.subjectInfeccioneses_ES
dc.subjectGenética
dc.titleAnálisis de la expresión de los genes codificantes para las moléculas MIP3α y SLPI en células epiteliales de trompa de Falopio humana infectadas con Neisseria gonorrhoeaees_ES
dc.typeTesises_ES
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