Identificación y caracterización funcional de AtUTr8, un nuevo transportador de nucleótidos-azúcar involucrado en la síntesis de pactinas en A.thaliana

dc.contributor.advisorOrellana L., Ariel
dc.contributor.advisorBlanco H., María Francisca
dc.contributor.authorTemple Sánchez, Henry Mauricio
dc.contributor.editorFacultad de Ciencias de la Vida
dc.contributor.editorEscuela de Bioquímica
dc.date.accessioned2021-03-10T18:24:58Z
dc.date.available2021-03-10T18:24:58Z
dc.date.issued2012
dc.descriptionTEXTO COMPLETO EN ESPAÑOLes_ES
dc.description.abstractLos transportadores de nucleótidos azúcar (NSTs) se encuentran en todo organismo eucariota. En plantas se ha propuesto que son requeridos para la biosíntesis de polisacáridos de la pared celular; sin embargo, hasta la fecha pocos NSTs han sido caracterizados y se desconoce cuál es la importancia de ellos en este proceso.Con el objetivo de identificar putativos NSTs, realizamos una búsqueda in silico de NSTs que co-expresen con genes previamente relacionados con la síntesis de polisacáridos de pared. En este trabajo se muestra la caracterización de un putativo NST que hemos denominado AtUTr8, el cual co-expresa con GATL5, enzima relacionada con la biosíntesis de pectina y con MUM4, relacionado con la formación de mucílago en Arabidopsis. Adicionalmente hemos confirmado la localización subcelular de AtUTr8 usando una proteína fusionada a GFP. Los resultados obtenidos sugieren que este transportador se encuentra localizado en la membrana del aparato de Golgi. La caracterización y análisis de dos líneas mutantes insercionales en AtUTr8, muestran una reducción de la acumulación de mucílago en semillas. Estos resultados nos sugieren que el producto génico de AtUTr8 sería esencial para la biosíntesis de polisacáridos presentes en el mucílago participando en la biosíntesis de pectinas.es_ES
dc.description.abstractNucleotide sugar transporters (NSTs) are present in every eukaryotic organisrn. In plants has been proposed that these proteins are required for the biosynthesis of the polysaccharides present in the cell wall; however, to date only few NSTs have been characterized and their irnportance in this biological process has not been shown.To identify others NSTs, we performed an in silico search of NSTs that coexpress with genes involved in cell wall biosynthesis. Frorn this analysis we identified a new NST and narned itAtUTr8. Also we confirmed the subcellular localization of AtUTr8 by fusing the protein to GFP. Additionally we analyze the phenotype of atutr8 rnutant plants by rutheniurn red staining and inrnunohistochernical assays using antibodies against cell wall cornponents. Our prior bioinformatics analysis shows that AtUTr8 has a high degree of coexpression with genes involved in rnucilage synthesis such as GATLS and MUM4. The AtUTr8 protein fused to GFP revealed a Golgi apparatus localization, confirmed by colocalization with other fluorescent organelle rnarkers. Subsequent analysis of two insertional lines on AtUTr8 shown a reduction in the accurnulation of pectinous rnucilage. This phenotype seerns to be related to the arnounts of RG-1 present in the rnucilage of rnutants cornpared to wild type seeds as determined by inrnunohistochernical assays. These results suggest that AtUTr8 is essential for the biosynthesis of polysaccharides present in the rnucilage. The overall results of this work evidence the irnportant role of NSTs in the biosynthesis of cell wall in plants.EN
dc.identifier.urihttp://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/18171
dc.language.isoeses_ES
dc.publisherUniversidad Andrés Belloes_ES
dc.subjectNucleótidoses_ES
dc.subjectPolisacáridos
dc.titleIdentificación y caracterización funcional de AtUTr8, un nuevo transportador de nucleótidos-azúcar involucrado en la síntesis de pactinas en A.thalianaes_ES
dc.typeTesises_ES
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