CaracterizaciĆ³n de los principales genes y metabolitos responsables del aumento de la acidez durante la maduraciĆ³n de la chirimoya (annona cherimola mill.)

dc.contributor.advisorGonzĆ”lez AgĆ¼ero,Mauricio
dc.contributor.advisorDefilippi B., Bruno
dc.contributor.authorTejerina Pardo, Luis Eugenio
dc.contributor.editorFacultad de Ciencias BiolĆ³gicas
dc.contributor.editorEscuela de IngenierĆ­a en BiotecnologĆ­a
dc.date.accessioned2017-05-05T18:17:56Z
dc.date.available2017-05-05T18:17:56Z
dc.date.issued2017
dc.descriptionTesis (Magister en BiotecnologĆ­a)es
dc.description.abstractLa chirimoya (Annona cherimola Mill.) es un fruto climatĆ©rico, subtropical del gĆ©nero Annonaceae. Madura rĆ”pidamente entre 6 a 7 dĆ­as, tiempo en el cual el fruto se ablanda, el almidĆ³n se reduce a azĆŗcares mĆ”s simples y a diferencia de otros frutos la acidez aumenta para dar su sabor caracterĆ­stico. Al igual que en otros frutos climatĆ©ricos, la producciĆ³n de los Ć”cidos orgĆ”nicos puede ser modulada por la acciĆ³n de la hormona etileno. En manzana y plĆ”tano se ha descrito que en la maduraciĆ³n es etileno-dependiente, mientras que en otros frutos, como en melĆ³n o tomate es etileno-independiente. Sin embargo, no se ha descrito ninguna relaciĆ³n entre la acciĆ³n del etileno, la acumulaciĆ³n de los Ć”cidos orgĆ”nicos en la chirimoya ni su regulaciĆ³n a nivel bioquĆ­mico ni molecular. Por esto en esta Tesis, se analizĆ³ el comportamiento del metabolismo de los Ć”cidos orgĆ”nicos a nivel de transcritos, mediante el estudio de los cambios en los principales genes involucrados en su sĆ­ntesis y degradaciĆ³n; a nivel proteico, con el estudio de la actividad en las enzimas claves de este metabolismo; y a nivel de metabolitos, mediante el estudio en la acumulaciĆ³n de los Ć”cidos orgĆ”nicos preponderantes (mĆ”lico y cĆ­trico) durante la maduraciĆ³n de la variedad ā€œConcha Lisaā€, en respuesta a la inhibiciĆ³n de la acciĆ³n del etileno. De los 9 genes relacionados a este metabolismo identificados en chirimoya en este trabajo, se observĆ³ un aumento en la expresiĆ³n de dos genes de sĆ­ntesis, el que codifica para la malato deshidrogenasa dependiente de NAD (cyNAD-MDH) y el de la citrato sintasa (mCS), aumento que se correlacionarĆ­a con el incremento medido para cada Ć”cido, lo que nos indicarĆ­a que estos genes serĆ­an claves para explicar el aumento de la acidez durante la maduraciĆ³n de la chirimoya. Por otra parte, nuestros resultados indican que el etileno no estarĆ­a regulando la acidez titulable de la chirimoya, pero si la acumulaciĆ³n de los Ć”cidos mĆ”lico y cĆ­trico. A su vez, el etileno estarĆ­a regulando los genes involucrados en la degradaciĆ³n del Ć”cido mĆ”lico y cĆ­trico; NADP-ME, ACON, ATP-CS y PEPC, y el de sĆ­ntesis de Ć”cido mĆ”lico gNAD-MDH, en los cuales se ve alterada su transcripciĆ³n durante la maduraciĆ³n, como tambiĆ©n en los genes principales relacionados a la sĆ­ntesis de ambos Ć”cidos (cyNAD-MDH y mCS) al compararse los tratamientos con Etileno y 1-MCP.es
dc.description.abstractFlavor is a major quality attribute in fruit formed by a mixture of volatile compounds, sugar and acid levels, typical of each fruit. Cherimoya (Annona cherimola Mill.) is a climacteric subtropical fruit which shows an acidity increase during ripening in contrast to most fruits. The hypothesis of this study is: ā€œEthylene regulates organic acids metabolism in cherimoya, causing a transcript increase of genes encoding PEPC and NAD-MDH enzymes and a transcript decrease of NADP-ME and ACON, resulting in malic and citric acid accumulationā€. For this, ā€œConcha Lisaā€ variety cherimoyas were harvested and stored at 20Ā°C under ethylene, 1-MCP and control conditions. To characterize the ripening process, ethylene production, respiration rate, flesh firmness, soluble solids and titratable acidity were determined and HPLC analysis was conducted for malic and citric acid quantitation. Additionally, expression of genes encoding key enzymes involved in the synthesis and degradation of these metabolites was determined by real-time PCR and activity assays were performed to observe the activity of these enzymes. Results show that all the measured ripening parameters were delayed by 1-MCP and the ethylene regulates the accumulation of malic and citric acid but not the titratable acidity. In addition, we achieve nine genes related to the organic acid metabolism, cyNAD-MDH and mCS are related directly at the increase of malic and citric acid respectively, and ethylene is related in the regulation of this genes together at the genes related to the degradation of this acids, specifically NADP-ME, gNAD-MDH, ACON, ATP-CS and PEP-C. For this and literature reviews, we postulate that the accumulation of this organic acids is for storage and the synthesis in cherimola fruit.
dc.identifier.urihttp://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/3370
dc.language.isoeses
dc.publisherUniversidad AndrƩs Belloes
dc.subjectChirimoyases
dc.subjectCalidades
dc.subjectMaduraciĆ³nes
dc.titleCaracterizaciĆ³n de los principales genes y metabolitos responsables del aumento de la acidez durante la maduraciĆ³n de la chirimoya (annona cherimola mill.)es
dc.typeTesises
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