Efecto del oxígeno molecular sobre la expresión de genes de la biosíntesis de giberelinas en la rizobacteria bradyrhizobium japonicum, simbiote de la soya

dc.contributor.advisorRojas Garrido, María Cecilia
dc.contributor.advisorCarú Marambio, Margarita
dc.contributor.authorMéndez Tapia, Constanza Eugenia
dc.contributor.editorFacultad de Ciencias Biológicas
dc.contributor.editorEscuela de Ingeniería en Biotecnología
dc.date.accessioned2024-10-11T18:35:15Z
dc.date.available2024-10-11T18:35:15Z
dc.date.issued2013
dc.descriptionTesis (Magíster en Biotecnología)
dc.description.abstractLa biosíntesis de fitohormonas, como giberelinas (GAs), por rizobacterias simbióticas podría formar parte de la interacción entre la bacteria y la planta hospedera. Particularmente Bradyrhizobium japonicum, simbionte de la soya (Glycine max.), presenta en su genoma un operón de genes involucrado en la biosíntesis de GAs, que incluye genes de diterpeno ciclasas (cps y ks), genes de monooxigenasas P450 (CYP 112, 114 y 117) y genes homólogos a los de ferredoxina (orf 3), prenil transferasa (orf 6) y reductasa (orf 4). El promotor presenta homología con promotores regulados anaeróbicamente, lo que sugiere que la tensión parcial de O2 sería un factor determinante en la expresión de estos genes. En esta Tesis se investigó la expresión de los genes que participan en la biosíntesis de GAs en cultivos líquidos aeróbicos y anaeróbicos de B. japonicum así como en bacteroides aislados desde nódulos de plantas de soya, tanto a nivel transcripcional como a nivel de las actividades enzimáticas. La actividad de oxidasas de GAs se ensayó administrando sustratos marcados con C e identificando los productos mediante cromatografia de gases acoplada a espectrometrfa de masa. Para los genes cps y ks se detectaron los mRNAs mediante RT-PCR. El sustrato de la oxidasa del carbono 20 (20ox), C-GA12, no fue transformado por los cultivos aeróbicos a diferencia de los cultivos anaeróbicos en los que se convirtió parcialmente a los productos C20 aldehído y el producto de oxidación del metilo 20 hasta CO2, 14C-GA9. Los bacteroides simbióticos presentaron una alta actividad de 20ox. En concordancia, se detectaron los mRNAs de cps y ks tanto en bacteroides simbióticos como en cultivos anaeróbicos, mientras que los cultivos aeróbicos no se detectaron transcritos de estos genes. La actividad de 20ox así como los mRNAs de cps y ks están presentes en bacteroides de plantas durante la etapa de floración lo que es consistente con la participación de las GAs bacterianas en la simbiosis. La metabolización de precursores tempranos de GAs demostró que el producto final de la secuencia biosintética en los bacteroides es GA9 y que no se sintetizan GAs hidroxiladas. La bacteria le entregaría a la planta este producto final, precursor de las GAs bioactivas como fitohormonas, el que podría ser posteriormente activado por hidroxilasas de la planta para participar en la etapa reproductiva de las plantas soya.
dc.identifier.urihttps://repositorio.unab.cl/handle/ria/61264
dc.language.isoes
dc.subjectBacteria Nodulante de la Soya
dc.subjectGiberelinas
dc.subjectPruebas
dc.titleEfecto del oxígeno molecular sobre la expresión de genes de la biosíntesis de giberelinas en la rizobacteria bradyrhizobium japonicum, simbiote de la soya
dc.typeTesis
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