Desarrollo de una elisa para la detección de anticuerpos IgM anti.ipnv en salmón

Vista sencilla de ítem
dc.contributor.advisorBurzio, Luis
dc.contributor.authorSoza Ried, Jorge Eugenio
dc.contributor.editorFacultad de Ecología y Recursos Naturales
dc.contributor.editorEscuela de Ciencias del Mar
dc.date.accessioned2017-02-07T20:47:56Z
dc.date.available2017-02-07T20:47:56Z
dc.date.issued2002
dc.descriptionTesis (Ingeniero en Acuicultura)es
dc.description.abstractLas pérdidas económicas generadas por el virus de la necrosis pancreática infecciosa (IPNV) han conllevado al desarrollo de técnicas para la rápida detección del patógeno y al control de la enfermedad mediante el uso de vacunas. En este contexto, se estudió el desarrollo de un ELISA que permitiría evaluar la respuesta inmune de los peces inmunizados. El primer objetivo fue caracterizar un panel de anticuerpos monoclonales anti-lgM de salmónidos, del cual se seleccionó el anticuerpo 3H7/E1 . Este anticuerpo fue exitosamente conjugado con peroxidasa , constituyendo uno de los componentes importantes en el desarrollo del ELISA. Además se determinó la concentración óptima de virus necesario para la activación de la placa, y la dilución del anticuerpo monoclonal anti-lgM conjugado a peroxidasa. Para la versión indirecta del ELISA, también se evaluó la dilución adecuada de un anti-lgG de ratón conjugado a peroxidasa. Para evaluar el ensayo se utilizó un panel de 49 sueros provenientes de peces vacunados con una virina del virus, y de 50 sueros de peces controles no vacunados. Al asumir un valor de corte ("cut-off') para el ensayo de ELISA de 0,3 0 .0 . a 450 nm, el grupo inmunizado presento un 89% de lecturas por sobre dicho valor, lo que sería equivalente a peces positivos. En el grupo control sólo un 44% de los sueros presentaba títulos de lgM altos contra el virus. Sin embargo, sueros que poseían altas lecturas de anticuerpos antiIPNV reaccionaron positivamente en placas activadas con Piscirickettsia sa/monis. Para determinar la especificidad de las lgM, estas fueron absorbidas con el virus, P. salmonis y otros patógenos de peces. Al absorber las lgM con los otros patógenos de peces se encontró que los títulos contra el virus o contra P. salmonis no fueron afectados. Sin embargo, los resultados de absorción con el virus o con P. salmonis indicaron que existe reacción cruzada de los sueros entre ambos patógenos, lo que sugiere que las lgM presentes en el suero son inespecíficas o reaccionan con epítopos de algunos antígenos que son comunes al virus y a P. salmonis.es
dc.description.abstractThe economic loss generated by the infectious necrosis pancreatic virus (IPNV) has lead to the development of techniques for fast detection of the pathogen and to control the disease by vaccination. In this context, the development of an ELISA which may allow us to evaluate the immune response of immunised fish has been studied. The first objective was to characterize a panel of monoclonal anti-salmon lgM antibodies, from which the 3H7/E1 antibody was selected. This antibody was successfully conjugated with peroxidasa, being one of the important component for the development of the ELISA. Furthermore, the optimal concentration of virus needed to activate the plate and the optimal dilution of the monoclonal anti-lgM antibody conjugated with peroxidasa was determinated. For the indirect version of the ELISA, we also evaluated the optimal dilution of a mouse anti-lgG antibody conjugated with peroxidasa. To evaluate the assay we used a panel of 49 fish sera that were vaccinated whit a virine vaccine against IPNV, and 50 sera of non immunized control fish. A "cut-off' value of 0,3 0.0. at 450 nm was assumed. The vaccinated group showed a 89% of lectures over that value, considering these fish as positives. In the control group, only 44 % of the serum presented high titres against the virus. However, serum that have positives lectures of antiIPNV antibodies reacted positively in ELISA plate activated with Piscirickettsia sa/monis. To determinate the lgM specifity, these sera were absorbed with the virus, P. sa/monis and other fish pathogens. When the serum was absorbed with the other fish pathogens, we found that the titres against the virus or against P. salmonis were not affected . Nevertheless, the results of the absorption with the virus or with P. salmonis showed that cross-reaction of the serum between these two pathogens exists, and suggesting that the lgM present in the serum are either non specific or reacted with sorne epitopes of antigen common to the virus and P. salmonis.
dc.identifier.urihttp://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/2939
dc.language.isoeses
dc.publisherUniversidad Andrés Belloes
dc.subjectSalmoneses
dc.subjectTest de Elisaes
dc.subjectDetección de anticuerposes
dc.titleDesarrollo de una elisa para la detección de anticuerpos IgM anti.ipnv en salmónes
dc.typeTesises
Archivos
Bloque original
Mostrando 1 - 1 de 1
No hay miniatura disponible
Nombre:
a32020_Soza_J_Desarrollo_de_una_elisa_para_2002.pdf
Tamaño:
28.8 MB
Formato:
Adobe Portable Document Format
Descripción:
TEXTO COMPLETO ESPAÑOL
Descargar
Bloque de licencias
Mostrando 1 - 1 de 1
No hay miniatura disponible
Nombre:
license.txt
Tamaño:
1.71 KB
Formato:
Item-specific license agreed upon to submission
Descripción:
Descargar
Colecciones
Fac.CV - Trabajos de Titulación Pre-Grado