Caracterización funcional de transportadores de UDP-Arabinofuranosa (AT3G17430 y AT1G48230) involucrados en la síntesis de mucílago de semillas de Arabidopsis thaliana

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dc.contributor.advisorSaez Aguayo, Susana
dc.contributor.advisorLargo Gosens, Asier
dc.contributor.authorFernández Llancañir, Allelen Zascka
dc.contributor.editorFacultad de Ciencias de la Vida
dc.date.accessioned2022-09-15T17:39:11Z
dc.date.available2022-09-15T17:39:11Z
dc.date.issued2022
dc.descriptionTesis (Magíster en Biotecnología y Ciencias de la Vida)es
dc.description.abstractLas semillas de Arabidopsis thaliana, tras ser embebidas en agua, liberan un mucílago el cual consiste en una matriz gelatinosa formada principalmente por polisacáridos pécticos. El mucílago de A. thaliana está compuesto mayoritariamente por Ramnogalacturonano-I (RGI) y Homogalacturonano (HG), junto con una menor cantidad de celulosa, xilanos, arabinanos y galactanos.. Las pectinas son sintetizadas por Glicosiltransferasas (GTs), localizadas en el aparato de Golgi, que utilizan nucleótidos-azúcar como sustrato para polimerizar estos polisacáridos. Estos nucleótidos-azúcar se sintetizan en su mayoría en el citosol y deben ser transportados hacia el lumen del Golgi para la polimerización de las pectinas. El mucílago ha sido utilizado para caracterizar los transportadores de UDP-Ramnosa/UDP-Galactosa (URGT2), de UDP-Arabinofuranosa (UAFT2) y de UDP-ácidos urónicos (UUAT1). Datos obtenidos in silico indican que los posibles transportadores de UDP-arabinofuranosa (UDPAraf), UAFT5 (AT3G17430) y UAFT6 (AT1G48230) se expresan específicamente en el tegumento de las semillas, durante toda la maduración de estas, lo que indica que es posible que tengan un rol en la biosíntesis de pectinas del mucílago. En este trabajo hemos seleccionado una línea mutante K.D. para UAFT5 y dos líneas K.O. para UAFT6. Estos mutantes mostraron una reducción del contenido de arabinosa (Ara) en la capa adherente del mucílago, pero no en la capa soluble, además, acompañado también de un aumento en el contenido de GalA y Rha en la capa soluble del mucílago, mientras que en la capa adherida estos mismos presentaron una disminución. Esto nos sugiere que la mutación en estos genes condujo a cambios en la distribución de RG-I y HG, provocando que estos polisacáridos sean más fácilmente extraíbles. Como se observó en el caso del UAFT2, mutantes en ambos genes presentaron cambios en marcaje con anticuerpos que reconocen diferentes graods de metilación del HG (JIM5 y LM20). También se observó una reducción en el contenido en metanol en el MA y un aumento de este en el MS, probablemente debido a que el HG se está extrayendo más fácilmente con agua. Por último, se observó en las mutantes un aumento en la actividad global de PME, enzima encargada de desmetilar los residuos de HG una vez secretado desde el lumen del Golgi a la pared celular. Esto nos sugiere que la disponibilidad de UDP-Araf puede afectar a la síntesis de los arabinanos RG-I e, indirectamente, produce cambios en la estructura del HG en compensación a la deficiencia en Ara en el mucílago.es
dc.identifier.urihttps://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/23891
dc.language.isoeses
dc.publisherUniversidad Andrés Belloes
dc.subjectArabidopsis Thalianaes
dc.subjectAnálisises
dc.subjectPolisacáridoses
dc.titleCaracterización funcional de transportadores de UDP-Arabinofuranosa (AT3G17430 y AT1G48230) involucrados en la síntesis de mucílago de semillas de Arabidopsis thalianaes
dc.typeTesises
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