Implementación del cultivo de la microalga Crypthecodinium cohnii bajo condiciones controladas para la obtención de una mayor carga lipidica como fuente de nutrición complementaria
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2004
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Universidad Andrés Bello
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Resumen
El ácido docosahexanoico es un ácido graso poliinsaturado de cadena larga, el cual, para la mayoría de los organismos es esencial, y generalmente no puede ser sintetizado por estos. De allí nace la idea de extraer este componente que se ocupa tanto en alimentación humana como en la de peces marinos. El ácido es el componente esencial en el recubrimiento de la vaina de mielina en células nerviosas. Dicho ácido además tiene función cardioprotectora (Harris, 1989), antidepresivo (Hibbeln and Salern, 1995) y según estudios previos disminuye el Alzheimer (Soderberg et al., 1991).
Con esta investigación se pretende, acondicionar la tecnología de cultivo del dinoflagelado heterótrofo, Crypthecodinium cohnii a escala piloto, la realización del cultivo microalgal, mantención de la cepa, determinación de la tasa de crecimiento, construcción de la curva de calibración con D.O. (densidad óptica), preparación del medio de cultivo óptimo (COHNII), en resumen, los datos básicos para realizar un cultivo que se pueda llevar a altas densidades celulares.
Inicialmente se evaluó en crecimiento celular con tres medios de cultivos descritos por distintos autores, evaluando el de mayor crecimiento. Se realizo el escalamiento del cultivo, partiendo en tubos de ensayo de 20ml, pasando a matraces Erlenmeyer de 250ml y finalmente en matraces de 1L, llegando a volúmenes de cultivo de aproximadamente 600ml.
La segunda fase de la investigación cuantificó la cantidad de lípidos totales presentes en las muestras obtenidas en el cultivo de Crypthecodinium cohnii, las que fueron realizadas de acuerdo a un diseño experimental, en donde se variaron 2 condiciones químicas del medio de cultivo, específicamente; la concentración de glucosa y la concentración de NaCl (de manera que respondiesen favorablemente, en relación a la cantidad de lípidos presente en la microalga). La determinación de los lípidos se realizó de acuerdo con el método de fosfovinillina, siendo esta la mejor alternativa para volúmenes de muestra pequeños (≈500mg),según Ahlgren y Merino (1991).La determinación de glucosa del medio, fue realizada de acuerdo al diseño experimental en donde se variaron las concentraciones iniciales de glucosa
y se realizo con el método de fenol- ácido sulfúrico (Dubois, M, 1956). Con estos datos básicos podremos inferir cual es el momento óptimo para realizar la cosecha y cuando se contendría la mayor cantidad de grasas (supuestamente poliinsaturadas, de la familia de las ϖ-3), además se determinará el consumo de glucosa por parte de la microalga en cul.
The docosahexanoic acid is a greasy poliinsaturated acid of long chain, which, for the most of the organisms is essential, and it cannot generally be synthesized by these. So this is the razon of the idea to produce this component that it used in the human feeding as in the marine fishes. This acid is the essential component in the covering of mielina in the nervous cells. This ácids, moreover, it has cardioprotector function (Harris, 1989), antidepressant (Hibbeln and Salern, 1995) and one assumes diminishes the Alzheimer (Soderberg ET al., 1991). With this project it is tried, to prepare tecnology of culture of heterotrophic dinoflagellate, Crypthecodinium cohnii in pilot scale, realization of the microalgal culture, stock manteniance, determination of growth rate, the calibration chart with D.O. (Optic density), preparation of optimun culture medium (COHNII), in summary, the basic data to make a culture that can be taken to cellular High Densities. Initially prube it with three mediums of cultures described by different authors, evaluating itself the one of greater growth. It made the escalamiento of the culture, starting off in test tubes of 20ml, passing to Erlenmeyer flask of 250ml and finally flask of 1L, arriving at volumes of culture from approximately 600ml. The second phase of investigation quantifies the amount of Total lipids and glucose, presents in the samples obtained in the culture of Crypthecodinium cohnii, those that were made according to experimental desing, in where varied 2 chemical conditions of culture means, specifically; concentration of glucose and concentration of NaCl. Determination of total lipids it carried out in agreement with method of fosfovinillin, being this the best alternative for volumes of sample smalls (≈500mg), according to Ahlgren and Merino (1991). Determination of glucose It made with a method of fenol- acid sulfuric (Dubois, M, 1956). With these basic data we will be able to infer as optimun is the moment to make the harvest and when content the greater amount of fats (supposedly poliinsaturadas, of the family of ω3), and is determined the glucose consumption of the microalgae in the culture.
The docosahexanoic acid is a greasy poliinsaturated acid of long chain, which, for the most of the organisms is essential, and it cannot generally be synthesized by these. So this is the razon of the idea to produce this component that it used in the human feeding as in the marine fishes. This acid is the essential component in the covering of mielina in the nervous cells. This ácids, moreover, it has cardioprotector function (Harris, 1989), antidepressant (Hibbeln and Salern, 1995) and one assumes diminishes the Alzheimer (Soderberg ET al., 1991). With this project it is tried, to prepare tecnology of culture of heterotrophic dinoflagellate, Crypthecodinium cohnii in pilot scale, realization of the microalgal culture, stock manteniance, determination of growth rate, the calibration chart with D.O. (Optic density), preparation of optimun culture medium (COHNII), in summary, the basic data to make a culture that can be taken to cellular High Densities. Initially prube it with three mediums of cultures described by different authors, evaluating itself the one of greater growth. It made the escalamiento of the culture, starting off in test tubes of 20ml, passing to Erlenmeyer flask of 250ml and finally flask of 1L, arriving at volumes of culture from approximately 600ml. The second phase of investigation quantifies the amount of Total lipids and glucose, presents in the samples obtained in the culture of Crypthecodinium cohnii, those that were made according to experimental desing, in where varied 2 chemical conditions of culture means, specifically; concentration of glucose and concentration of NaCl. Determination of total lipids it carried out in agreement with method of fosfovinillin, being this the best alternative for volumes of sample smalls (≈500mg), according to Ahlgren and Merino (1991). Determination of glucose It made with a method of fenol- acid sulfuric (Dubois, M, 1956). With these basic data we will be able to infer as optimun is the moment to make the harvest and when content the greater amount of fats (supposedly poliinsaturadas, of the family of ω3), and is determined the glucose consumption of the microalgae in the culture.
Notas
Tesis (Ingeniería en Acuicultura)
Palabras clave
Cultivo de microalgas, Lípidos, Tecnología de cultivos, Chile