Estudio de la localizaciĆ³n subcelular de las isoformas de la proteĆ­na X (HBx) del virus de la hepatitis B (HBV)

dc.contributor.advisorLoyola Pedevila, Alejandra
dc.contributor.authorGarrido Norambuena, Daniel Gervasio
dc.contributor.editorFacultad de Ciencias BiolĆ³gicas
dc.contributor.editorEscuela de BioquĆ­mica
dc.date.accessioned2024-12-31T17:22:30Z
dc.date.available2024-12-31T17:22:30Z
dc.date.issued2017
dc.descriptionTesis (BioquĆ­mico, MagĆ­ster en BioquĆ­mica)
dc.descriptionEsta tesis se realizĆ³ en el Laboratorio de Cromatina y EpigenĆ©tica de la FundaciĆ³n Ciencia y Vida y fue fmanciada por el proyecto ANILLOS ACT 1119 titulado "Mecanismos moleculares del cĆ”ncer. Examinando la funciĆ³n de la cromatina en la replicaciĆ³n de HBV y leucemia" proyecto BASAL PFB-16, FONDECYT 1160480 y beca CONICYT 21140956 (Sergio HernĆ”ndez, 2014).
dc.description.abstractEl Virus de la Hepatitis B (HBV) codifica para la proteĆ­na X (IiBx), una pequeƱa proteĆ­na no estructural a la cual se le atribuyen mĆŗltiples funciones dentro de la cĆ©lula infectada, tales como controlar el ciclo replicativo viral, regular el ciclo celular y participar en el desarrollo del Carcinoma Hepatocelular (HCC). El transcrito de HBx posee codones internos de inicio de la traducciĆ³n, lo cual sugiere la traducciĆ³n de isoformas de HBx. La localizaciĆ³n subcelular de HBx varĆ­a segĆŗn su nivel de expresiĆ³n, localizĆ”ndose en el nĆŗcleo a bajos niveles de expresiĆ³n y en el citoplasma a altos niveles de expresiĆ³n. Nuestra hipĆ³tesis considera que las isoformas de HBx tienen una localizaciĆ³n subcelular distinta cuando son expresadas de manera individual y que varĆ­a segĆŗn su nivel de expresiĆ³n. Para investigar esto se generaron mutantes que expresan de manera individual cada isoforma, y luego, mediante tĆ©cnicas de fluorescencia, se determinĆ³ la localizaciĆ³n subcelular de cada isoforma, variando ademĆ”s su nivel de expresiĆ³n. Los resultados de microscopĆ­a indican que cada isoforma de manera individual presenta una localizaciĆ³n subcelular diferente. AdemĆ”s, al expresarlas en combinaciones, la localizaciĆ³n final tambiĆ©n varĆ­a. Finalmente serĆ­a importante analizar a futuro cĆ³mo estas isoformas interactĆŗan entre sĆ­, siendo de manera directa o mediante otras proteĆ­nas, asĆ­ como tambiĆ©n analizar el comportamiento de las isoformas en el contexto viral.
dc.description.abstractHepatitis B virus (HBV) codes for protein X (HBx), a small non-structural protein with multiple functions within infected cell, such as control the viral replicative cycle, regulate the cell cycle and participate in the development of Hepatocellular Carcinoma (HCC). The HBx transcript has three in-frame translational initiation codons, which suggests the translation of three HBx isoforms. The subcellular HBx localization varies according to its expression level, localizing in the nucleus at low expression levels and in the cytoplasm at high expression levels. Our hypothesis considers that the isoforms of HBx have a different subcellular location when they are expressed individually and varies according to their expression level. To investigate this, different DNA constructs were generated by mutagenesis to individually express each isoform, and then, by indirect immunofluorescence or fluorescence, the subcellular localization of each isoform was determined at different expression levels. In addition, the co-expression of these isoforms was analysed. Microscopy results indicated that each isoform individually exhibits a different subcellular localization. In addition, when expressed in combinations, the fmal location also varied. Finally it would be important to analyse, in the future, how these isoforms interact with one another, directly or through other proteins, as well as to analyse the behaviour of the isoforms in the viral context.
dc.identifier.urihttps://repositorio.unab.cl/handle/ria/62882
dc.language.isoes
dc.publisherUniversidad AndrƩs Bello
dc.subjectIsoformas de ProteĆ­nas
dc.subjectHepatitis B
dc.titleEstudio de la localizaciĆ³n subcelular de las isoformas de la proteĆ­na X (HBx) del virus de la hepatitis B (HBV)
dc.typeTesis
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