Evaluación de los efectos no canónicos de cortisol sobre la activación de las vías PKA y PKC y la expresión de genes pro miogénicos en miotubos de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss)
| dc.contributor.advisor | Valdés, Juan Antonio | |
| dc.contributor.author | Figueroa Zimmermann, Consuelo Pilar Verena | |
| dc.contributor.editor | Facultad de Ciencias de la Vida | |
| dc.contributor.editor | Escuela de Ingeniería en Biotecnología | |
| dc.date.accessioned | 2019-10-08T21:18:46Z | |
| dc.date.available | 2019-10-08T21:18:46Z | |
| dc.date.issued | 2019 | |
| dc.description | Tesis (Ingeniero en Biotecnología) | es |
| dc.description.abstract | Los glucocorticoides son reguladores críticos de los procesos celulares que le permiten a los vertebrados lidiar con estresores. En el caso de los teleósteos, el cortisol es la principal hormona glucocorticoide circulante y está involucrado en una serie de procesos fisiológicos a nivel celular. Se ha descrito que cortisol ejerce sus efectos celulares a través de dos mecanismos: la vía de señalización genómica o clásica, y la vía no genómica o iniciada en la superficie. La señalización genómica, que involucra la interacción de cortisol con sus receptores intracelulares, ha sido ampliamente estudiada. Sin embargo, la señalización no genómica recién se ha empezado a caracterizar. Dentro de las vías descritas que están involucradas en esta señalización no genómica de cortisol se encuentran las vías mediadas por PKA y PKC, que se describen en diferentes tejidos en vertebrados, y más recientemente en cultivo de hepatocitos de trucha arcoíris. A pesar de ello, en el caso de músculo esquelético en teleósteos, éstas no han sido estudiadas. Por lo tanto, en este trabajo evaluamos la contribución de la vía no genómica de cortisol sobre la modulación de PKA y PKC en un cultivo primario de miotubos de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss). Además, determinamos la participación de estas vías en la expresión de genes pro miogénicos claves para el crecimiento y diferenciación del músculo esquelético. Para este propósito, los miotubos fueron estimulados con dosis fisiológicas de cortisol y cortisol-BSA (inductor exclusivo de efectos de cortisol iniciados en la superficie celular). Luego se evaluó mediante Western blot la activación de PKA, PKC y CREB en este modelo in vitro, donde se observó una activación temprana de PKC y PKA a 15 y 60 minutos de estimulación con cortisol-BSA, respectivamente, además de una tendencia a la activación de CREB a 30 minutos de estimulación, denotando una posible modulación por la acción no genómica de cortisol. Adicionalmente, los miotubos se pre-trataron con el inhibidor H-89 para PKA, para comprobar el rol directo de esta vía en la señalización no genómica de cortisol, y su participación en la modulación de los genes pro miogénicos myf5 y pax3. En miotubos estimulados con inhibidor, se observó un aumento en la expresión de pax3 a 1 hora de tratamiento con cortisol-BSA, efecto que fue revertido a las 6 horas. Esto podría deberse a un posible rol inhibidor por parte de PKA. Por otro lado, la expresión de myf5 tiende a disminuir en presencia de estímulo más inhibidor a 1 hora, y al aumento a 6 horas bajo los mismos estímulos, lo que indicaría una posible modulación de éste gen por PKA, pero ejerciendo un rol activador. Sin embargo, estas hipótesis requieren de más experimentos para ser aceptadas. Se puede concluir en esta investigación que la vía alternativa de cortisol modula la activación de las proteínas PKA y PKC y la expresión de los genes blanco pax3 y myf5 en músculo esquelético, lo cual es de suma importancia para ampliar y profundizar los conocimientos que se tienen con respecto al rol de los glucocorticoides en éste tejido. | es |
| dc.identifier.uri | http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/10357 | |
| dc.language.iso | es | es |
| dc.publisher | Universidad Andrés Bello | es |
| dc.subject | Trucha Arco Iris | es |
| dc.subject | Cortisol | es |
| dc.title | Evaluación de los efectos no canónicos de cortisol sobre la activación de las vías PKA y PKC y la expresión de genes pro miogénicos en miotubos de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) | es |
| dc.type | Tesis | es |
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