Diseño de un sistema de transformación y selección por complementación para la levadura vínica dekkera bruxellensis
| dc.contributor.advisor | Ganga Muñoz, María Angélica | |
| dc.contributor.author | Peña Bernales, Rubén Eduardo | |
| dc.contributor.editor | Escuela de Bioquímica. | |
| dc.date.accessioned | 2021-03-25T15:10:56Z | |
| dc.date.available | 2021-03-25T15:10:56Z | |
| dc.date.issued | 2011 | |
| dc.description | Tesis (Bioquímico, Magíster en Bioquímica) | es |
| dc.description.abstract | Dekkera bruxellensis es la principal contaminante de vinos debido a su capacidad de generar productos aromáticos no deseados, especialmente del tipo fenólicos. Existen diversos estudios sobre la ruta metabólica de producción de estos aromas, pero son muy pocos los estudios a nivel molecular. Esto se debe principalmente a que no se ha desarrollado un sistema de transformación para esta levadura. Basado en esto, el objetivo de este trabajo fue implementar un sistema de transformación para D. bruxellensis mediante la obtención de una mutante auxótrofa para uracilo y el diseño de un vector que permita la complementación en cis de esta auxotrofía. Para ello, mediante mutagénesis química con N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina se obtuvo una cepa auxótrofa para uracilo, denominada D. bruxellensis L2991 uraT El gen ura3 de esta mutante fue secuenciado y posteriormente traducido in sílico, identificando mutaciones en la región amino-terminal de la orotidina S-fosfato descarboxilasa. Paralelamente, se diseñó el vector pURA-BARSl, el cual posee el gen ura3 de D. bruxellensis y una secuencia de tipo ARS de esta levadura. Este vector fue funcional en S. cerevisiae obteniendo colonias que recuperaron el fenotipo URA +. Finalmente, utilizando un tratamiento con acetato de litio y electroporación se logró la transformación de D. bruxellensis L2991 ura3- con el vector pURA-BARSl. Esta transformación fue confirmada mediante purificación del vector y amplificación del gen bla (resistencia ampicilina). Estos resultados indican que el vector pURA-BARS 1 es funcional en S. cerevisiae y D. bruxellensis, permitiendo así comprobar la funcionalidad del sistema de transformación diseñado. | es |
| dc.identifier.uri | http://repositorio.unab.cl/xmlui/handle/ria/18294 | |
| dc.language.iso | es | es |
| dc.publisher | Universidad Andrés Bello | es |
| dc.subject | Vino Efecto de las Levaduras | es |
| dc.subject | Compuestos Aromáticos | es |
| dc.title | Diseño de un sistema de transformación y selección por complementación para la levadura vínica dekkera bruxellensis | es |
| dc.type | Tesis | es |
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